作者sarahls (~sarah~)
看板Biotech
标题[问题]GST纯化的resin
时间Mon Aug 9 23:26:37 2010
我想请问纯化GST蛋白的resin大家会重复使用吗???
如果是不同的蛋白
会不会重新配制呢?(因为怕污染这样!!??)
虽然说有regeneration这个步骤
那是不是就乾净了呢?
可以继续使用
不同蛋白也没关系??
因为有学长讲说怕污染
所以一直重配@@
那不就都不用regeneration
用过就换掉~这样是不是太浪费???
另外
我再问一下~有人用pQE30作为表现蛋白的系统吗??
因为我一直找不到好的诱导条件ˊˋ
网路上查的也一直在try~~
也都没比较明显的band> <
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.27.190.165
1F：推 kalfan1:不放心就多洗几次 如果未来是要跑western这种条带 08/09 23:35
2F：→ kalfan1:会分开的 那有其他蛋白存在也没有关系 08/09 23:36
3F：→ kalfan1:你纯化前不就是有无数种蛋白质 08/09 23:36
4F：→ sarahls:可是我纯化完是要直接送去做抗体的耶~而且我怕污染的是上 08/09 23:47
5F：→ sarahls:一个不同GST蛋白的东西压~~ 08/09 23:48
6F：推 a001ou:如果真的不放心 那就跑一片western胶染comassive blue 08/10 02:17
7F：→ a001ou:就知道洗的到底乾不乾净 08/10 02:17
8F：推 tsubasawolfy:单纯HIS纯化完+浓缩如果可以得到很好的single band 08/10 11:08
9F：→ tsubasawolfy:算运气好..通常都还要过gel filtration拿到更纯的 08/10 11:09
10F：推 bluecsky:是有洗的这麽不乾净吗 囧 再说你一般存resin的条件下 08/11 03:35
11F：→ bluecsky:蛋白也不会stable到哪去 而且大多不会一个tag就拿到纯的 08/11 03:35
12F：→ bluecsky:大不了同一种蛋白就一直重复用那一批resin 不够再拿新的 08/11 03:35
13F：→ bluecsky:补一点 有做好wash跟regeneration 可以用很久的 08/11 03:36