作者kingtiger (~（⊙ｏ⊙）~)
看板Biotech
標題[討論] 配SDS-PAGE用的buffer產生結晶
時間Tue May 25 16:43:49 2010
我配的是1.5M Tris-HCl 500ml + 10% SDS 20 ml,補水補到1L
做為下層膠的buffer
但在室溫下放置一天後產生了結晶物(白色細針狀)
且試過再加一倍體積的水也是無法溶解之
想請問是什麼出了問題,我是用血清瓶裝的
一開始以為是因為過飽和而造成的鹽析作用
但是昨天剛配好1.5M Tris-HCl並補水後再加SDS並沒有出現結晶
而是到今天才出現的
想問看看是何原因,有沒有解決的方法
我的Tris-HCl是用JTBaker的,以水溶解後再以10N NaOH調至pH=8.8
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◆ From: 140.109.40.29
1F：推 tsubasawolfy:tris-hcl不是先用tris泡好再用Hcl下去滴嗎@@? 05/25 17:02
2F：推 iris416:我也碰過這種情形!!!!! 其實還是可以用的(我用過了) 05/25 17:05
3F：→ iris416:看你敢不敢而已 如果data很重要的話就重泡吧 05/25 17:06
4F：→ kingtiger:確實,用NaOH似乎會增加Na+離子於溶液中...... 05/25 17:06
5F：→ kingtiger:回應二樓,我也做了,只是膠凝固的速度不一致 05/25 17:07
6F：推 iris416:推樓上!! NaOH可能也是原因之一... 05/25 17:08
7F：→ iris416:其實硬著頭皮做是下下策啦 應該要重新配過比較好.. 05/25 17:10
8F：推 vetvet:校正完ph值以後，過0.45的濾膜吧!大多數時候是因為bufer 05/25 23:32
9F：→ vetvet:裡面殘存著沒有溶解完全的晶體顆粒，所形成的結晶 05/25 23:33
10F：推 loham:SDS可以過膜嗎? 05/26 01:09
11F：→ iceking:Tris-HCl不要跟SDS先混在一起,至於4度冰箱存放 05/26 15:36
12F：推 vetvet:可以過阿~ 05/27 01:49
13F：推 littlelizard:要看 pH值阿 如果你要 pH 高的那要用Tris base 05/29 19:49
14F：→ littlelizard:再用 HCl 滴定 如果你直接用 Tris-HCl powder 那 pH 05/29 19:51
15F：→ littlelizard:大約會是 3.* 然後要用 NaOH 低很多很多 就會太多鹽 05/29 19:51
16F：推 gbp1203:推樓上!! 05/30 12:20