作者kingtiger (~（⊙ｏ⊙）~)
看板Biotech
标题[讨论] 配SDS-PAGE用的buffer产生结晶
时间Tue May 25 16:43:49 2010
我配的是1.5M Tris-HCl 500ml + 10% SDS 20 ml,补水补到1L
做为下层胶的buffer
但在室温下放置一天後产生了结晶物(白色细针状)
且试过再加一倍体积的水也是无法溶解之
想请问是什麽出了问题,我是用血清瓶装的
一开始以为是因为过饱和而造成的盐析作用
但是昨天刚配好1.5M Tris-HCl并补水後再加SDS并没有出现结晶
而是到今天才出现的
想问看看是何原因,有没有解决的方法
我的Tris-HCl是用JTBaker的,以水溶解後再以10N NaOH调至pH=8.8
--
. ′人生五十一睡梦 .＊ * ◢ ◢◣︿◢◣
. ＊* 一期荣华一杯酒 *′. ◤◣ ◤︺◥ ◢
▁▁ ◤
◣μ◢◥
-
上杉谦信(1530~1578) -
※ ◣◢︸◣◢◤◣
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.40.29
1F：推 tsubasawolfy:tris-hcl不是先用tris泡好再用Hcl下去滴吗@@? 05/25 17:02
2F：推 iris416:我也碰过这种情形!!!!! 其实还是可以用的(我用过了) 05/25 17:05
3F：→ iris416:看你敢不敢而已 如果data很重要的话就重泡吧 05/25 17:06
4F：→ kingtiger:确实,用NaOH似乎会增加Na+离子於溶液中...... 05/25 17:06
5F：→ kingtiger:回应二楼,我也做了,只是胶凝固的速度不一致 05/25 17:07
6F：推 iris416:推楼上!! NaOH可能也是原因之一... 05/25 17:08
7F：→ iris416:其实硬着头皮做是下下策啦 应该要重新配过比较好.. 05/25 17:10
8F：推 vetvet:校正完ph值以後，过0.45的滤膜吧!大多数时候是因为bufer 05/25 23:32
9F：→ vetvet:里面残存着没有溶解完全的晶体颗粒，所形成的结晶 05/25 23:33
10F：推 loham:SDS可以过膜吗? 05/26 01:09
11F：→ iceking:Tris-HCl不要跟SDS先混在一起,至於4度冰箱存放 05/26 15:36
12F：推 vetvet:可以过阿~ 05/27 01:49
13F：推 littlelizard:要看 pH值阿 如果你要 pH 高的那要用Tris base 05/29 19:49
14F：→ littlelizard:再用 HCl 滴定 如果你直接用 Tris-HCl powder 那 pH 05/29 19:51
15F：→ littlelizard:大约会是 3.* 然後要用 NaOH 低很多很多 就会太多盐 05/29 19:51
16F：推 gbp1203:推楼上!! 05/30 12:20