作者sunnyforever ( )
看板Biotech
標題[討論] cell culture用的meduim量
時間Mon May 24 18:17:43 2010
實驗是用10cm dish
上次在繼代時
我加入10ml medium 被實驗室的人說浪費亂加
說只要5ml就好
我說 剛繼代應該細胞要比較好的營養
medium太少很容易變黃且細胞可能會長不好
聽說medium加這麼多會壓到細胞長不好
我蠻疑惑的
請問這是真的嗎?
若只是想要省medium我可以理解
後來有個同學聽別人說過 加10ml會讓貼附的細胞距離氧氣比較遠
不容易吸收到氧氣
請問版上的大大有什麼建議嗎=.=
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◆ From: 140.116.25.156
1F：→ ko363630:我們家的也是加5ml，10ml太多了 細胞會長不好 05/24 18:37
2F：→ ranilla:我猜哪是因為你們老師也是用猜的 05/24 18:43
3F：→ ko363630:如果繼代要長得好 為什麼不提高medium的濃度 而是提高量 05/24 18:59
4F：→ sunnyforever:恩 我只是想知道是不是有10ml太多壓到細胞生長 05/24 19:02
5F：→ sunnyforever:或是因為距離空氣太遠而長不好的說法 05/24 19:03
6F：→ sunnyforever:因為我看書上或是一般其他人做 都是8~10ml 05/24 19:03
7F：推 tsubasawolfy:5應該只是薄薄的一層剛好蓋過.. 05/24 19:08
8F：→ tsubasawolfy:10cm+10 15cm+20 太少medium對代謝旺盛的細胞無法 05/24 19:08
9F：→ tsubasawolfy:平衡pH值才比較傷吧 05/24 19:09
10F：→ ssds:我想省medium還被助理念說加太少細胞長不好，要我加15ml= = 05/24 19:12
11F：→ spirithorse:我們LAB是加5-6ml,反正加太多容易傾斜逸出來 05/24 19:38
12F：→ spirithorse:老師是跟我說過,medium的養份其實都是過量的 05/24 19:39
13F：→ mzac1b:個人覺得你老闆是那5ml 數字是瞎說的 沒啥根據 05/24 20:10
14F：→ mzac1b:一般使用方法建議量不會這麼少 05/24 20:11
15F：→ mzac1b:但你的細胞這麼不容易死的話 是有可能可以活的好 05/24 20:12
16F：→ mzac1b:我的經驗這麼少的培養液會養到部分區域乾掉 05/24 20:12
17F：→ xiphos:我們用8ml 05/24 20:57
18F：推 afunafun:八分哲學 05/24 21:01
19F：→ celestial318:我們平常養用8-10 有加藥等其他處理時用5 05/24 21:44
20F：→ hc0122:medium太多細胞被壓？？ 第一次聽到勒 05/24 23:25
21F：→ untilnow:你的細胞會托夢給你：我的背上好重啊... 05/24 23:59
22F：推 leoblack:說會壓到細胞長不好的,sense有問題~想省錢就直說~還壓勒 05/25 00:14
23F：推 iceking: 別再相信沒有根據的說法了 05/25 09:49
24F：→ iceking: 11531那篇推文的網址,真的是很好的課 05/25 09:51
25F：→ iceking: 打錯 是11513 05/25 09:51
26F：→ sunnyforever:謝謝大家的意見~ 05/25 10:51
27F：推 Fourfish:我記得組培的書有寫 medium液面高度影響氣體交換的速率 05/25 12:11
28F：推 icome:別再相信沒有根據的傳說了...10cm dish可以加到15ml 05/25 12:13
29F：→ Fourfish:一般建議液高約0.2mm 所以T25要加5ml T75則加15ml 05/25 12:14
30F：→ icome:只是為了省medium我都加6ml 如果放三天會加到8ml 05/25 12:14
31F：→ Fourfish:圓形10cm dish加10ml都有點嫌少了 05/25 12:15
32F：推 kshsdeck:各種細胞用的medium濃度是固定的,提高濃度會改變滲透壓 05/25 15:47
33F：→ kshsdeck:只放薄薄的一層 要考慮到蒸發的問題 對濃度影響較大 05/25 15:50
34F：→ kshsdeck:一般在dish或flask裡養的細胞 即使長滿養分都夠放好幾天 05/25 15:52
35F：→ kshsdeck:但要考慮細胞產生的代謝物和pH的下降 05/25 15:53
36F：推 kshsdeck:以上就是為什麼大家都行之有年的用8-10ml去養10cm dish 05/25 15:59
37F：→ kshsdeck:而不做一些奇奇怪怪的改變 05/25 16:00
38F：→ saviora:你就先看組培的書 然後照老闆的話去做順便錄音 05/25 17:48
39F：→ saviora:等到實驗有問題時在拿組培的書跟老闆說 05/25 17:48
40F：→ saviora:細胞被壓這種話聽起來真的很猛 05/25 17:49
41F：推 bluecsky:壓細胞真是新的說法 應該好好研究一下 05/25 19:02
42F：推 leoblack:液面高度並非絕對~像藥物處理或transfection時,就常改變 05/25 19:11
43F：推 tsubasawolfy:10cm dish面積為78.5cm^2 5mL體積下液高0.063cm 05/25 19:30
44F：→ tsubasawolfy:10mL體積下液高0.127cm 人類細胞直徑為10-30uM 05/25 19:31
45F：→ tsubasawolfy:取中間值的話 5mL跟10mL對細胞增加的壓力為 05/25 19:32
46F：→ tsubasawolfy:1.13X10^-5 g 不知道對細胞重不重? 05/25 19:33
47F：→ mtdas:10cm dish的實際面積約為57cm^2 05/25 22:25
48F：推 mtdas:另外根據Freshney的Culture of Animal Cells內容提到.. 05/25 22:40
49F：→ mtdas:高需氧的細胞建議0.2mL/cm^2 低需氧的細胞則可0.5mL/cm^2 05/25 22:40
50F：推 tsubasawolfy:原來內徑才4.2cm 05/25 22:56
※ 編輯: sunnyforever 來自: 140.116.192.147 (05/26 00:14)