作者sunnyforever ( )
看板Biotech
标题[讨论] cell culture用的meduim量
时间Mon May 24 18:17:43 2010
实验是用10cm dish
上次在继代时
我加入10ml medium 被实验室的人说浪费乱加
说只要5ml就好
我说 刚继代应该细胞要比较好的营养
medium太少很容易变黄且细胞可能会长不好
听说medium加这麽多会压到细胞长不好
我蛮疑惑的
请问这是真的吗?
若只是想要省medium我可以理解
後来有个同学听别人说过 加10ml会让贴附的细胞距离氧气比较远
不容易吸收到氧气
请问版上的大大有什麽建议吗=.=
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.25.156
1F：→ ko363630:我们家的也是加5ml，10ml太多了 细胞会长不好 05/24 18:37
2F：→ ranilla:我猜哪是因为你们老师也是用猜的 05/24 18:43
3F：→ ko363630:如果继代要长得好 为什麽不提高medium的浓度 而是提高量 05/24 18:59
4F：→ sunnyforever:恩 我只是想知道是不是有10ml太多压到细胞生长 05/24 19:02
5F：→ sunnyforever:或是因为距离空气太远而长不好的说法 05/24 19:03
6F：→ sunnyforever:因为我看书上或是一般其他人做 都是8~10ml 05/24 19:03
7F：推 tsubasawolfy:5应该只是薄薄的一层刚好盖过.. 05/24 19:08
8F：→ tsubasawolfy:10cm+10 15cm+20 太少medium对代谢旺盛的细胞无法 05/24 19:08
9F：→ tsubasawolfy:平衡pH值才比较伤吧 05/24 19:09
10F：→ ssds:我想省medium还被助理念说加太少细胞长不好，要我加15ml= = 05/24 19:12
11F：→ spirithorse:我们LAB是加5-6ml,反正加太多容易倾斜逸出来 05/24 19:38
12F：→ spirithorse:老师是跟我说过,medium的养份其实都是过量的 05/24 19:39
13F：→ mzac1b:个人觉得你老板是那5ml 数字是瞎说的 没啥根据 05/24 20:10
14F：→ mzac1b:一般使用方法建议量不会这麽少 05/24 20:11
15F：→ mzac1b:但你的细胞这麽不容易死的话 是有可能可以活的好 05/24 20:12
16F：→ mzac1b:我的经验这麽少的培养液会养到部分区域乾掉 05/24 20:12
17F：→ xiphos:我们用8ml 05/24 20:57
18F：推 afunafun:八分哲学 05/24 21:01
19F：→ celestial318:我们平常养用8-10 有加药等其他处理时用5 05/24 21:44
20F：→ hc0122:medium太多细胞被压？？ 第一次听到勒 05/24 23:25
21F：→ untilnow:你的细胞会托梦给你：我的背上好重啊... 05/24 23:59
22F：推 leoblack:说会压到细胞长不好的,sense有问题~想省钱就直说~还压勒 05/25 00:14
23F：推 iceking: 别再相信没有根据的说法了 05/25 09:49
24F：→ iceking: 11531那篇推文的网址,真的是很好的课 05/25 09:51
25F：→ iceking: 打错 是11513 05/25 09:51
26F：→ sunnyforever:谢谢大家的意见~ 05/25 10:51
27F：推 Fourfish:我记得组培的书有写 medium液面高度影响气体交换的速率 05/25 12:11
28F：推 icome:别再相信没有根据的传说了...10cm dish可以加到15ml 05/25 12:13
29F：→ Fourfish:一般建议液高约0.2mm 所以T25要加5ml T75则加15ml 05/25 12:14
30F：→ icome:只是为了省medium我都加6ml 如果放三天会加到8ml 05/25 12:14
31F：→ Fourfish:圆形10cm dish加10ml都有点嫌少了 05/25 12:15
32F：推 kshsdeck:各种细胞用的medium浓度是固定的,提高浓度会改变渗透压 05/25 15:47
33F：→ kshsdeck:只放薄薄的一层 要考虑到蒸发的问题 对浓度影响较大 05/25 15:50
34F：→ kshsdeck:一般在dish或flask里养的细胞 即使长满养分都够放好几天 05/25 15:52
35F：→ kshsdeck:但要考虑细胞产生的代谢物和pH的下降 05/25 15:53
36F：推 kshsdeck:以上就是为什麽大家都行之有年的用8-10ml去养10cm dish 05/25 15:59
37F：→ kshsdeck:而不做一些奇奇怪怪的改变 05/25 16:00
38F：→ saviora:你就先看组培的书 然後照老板的话去做顺便录音 05/25 17:48
39F：→ saviora:等到实验有问题时在拿组培的书跟老板说 05/25 17:48
40F：→ saviora:细胞被压这种话听起来真的很猛 05/25 17:49
41F：推 bluecsky:压细胞真是新的说法 应该好好研究一下 05/25 19:02
42F：推 leoblack:液面高度并非绝对~像药物处理或transfection时,就常改变 05/25 19:11
43F：推 tsubasawolfy:10cm dish面积为78.5cm^2 5mL体积下液高0.063cm 05/25 19:30
44F：→ tsubasawolfy:10mL体积下液高0.127cm 人类细胞直径为10-30uM 05/25 19:31
45F：→ tsubasawolfy:取中间值的话 5mL跟10mL对细胞增加的压力为 05/25 19:32
46F：→ tsubasawolfy:1.13X10^-5 g 不知道对细胞重不重? 05/25 19:33
47F：→ mtdas:10cm dish的实际面积约为57cm^2 05/25 22:25
48F：推 mtdas:另外根据Freshney的Culture of Animal Cells内容提到.. 05/25 22:40
49F：→ mtdas:高需氧的细胞建议0.2mL/cm^2 低需氧的细胞则可0.5mL/cm^2 05/25 22:40
50F：推 tsubasawolfy:原来内径才4.2cm 05/25 22:56
※ 编辑: sunnyforever 来自: 140.116.192.147 (05/26 00:14)