作者FENOR (FENOR)
看板Biotech
標題[求救] 請問這樣是不是因為菌量太多
時間Thu May 6 14:32:10 2010
小弟我今天抽E.coli的genomic DNA
加入了TE buffer 還有SDS 跟Proteinase K
過了一個小時後進行了phenol/chloroform沉澱和離心，
就在離心完之後要抽取上清液的時候，
發現這部分居然凝結成一塊果凍..............
是不是因為菌量太多導致核酸濃度太大啊?
請問有人有遇到過類似的問題嗎?
備註:我是挑菌的單一菌落養在3CC LB養了約十六小時。
冏，唯一可以肯定的是這次應該是做不下去了@@
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◆ From: 140.112.135.172
※ 編輯: FENOR 來自: 140.112.135.172 (05/06 14:33)
1F：→ sardine:雖然我看不知道問題在哪 但提供你一個數據 05/06 20:34
2F：→ sardine:學長養了100公升的菌overnight 收獲量預估是600mg 05/06 20:35
3F：推 Rarelay:一百公升阿...？！ 05/06 23:13
4F：推 sheepfeather:100L要用發酵槽養了吧 XD 05/06 23:54
5F：→ yaprint:是因為SDS的關係嗎 低溫會凝固 只是猜猜～ 05/07 18:39
6F：推 Fourfish:應該是DNA太濃沒錯 用傳統法抽質體也會有這一坨果凍(3ml) 05/08 00:25
7F：→ Fourfish:只是抽質體是把這一坨果凍(gDNA)用牙籤挑掉 05/08 00:26
8F：→ Fourfish:光抽質體1.5ml菌就抽出一堆了 如果只是要抽DNA跑PCR的話 05/08 00:28
9F：→ Fourfish:應該用幾十或百ul抽就夠用了吧... 05/08 00:29
10F：→ snowypuppy:100公升好驚人呀...我家一個mini都養5ml 05/08 01:30