作者FENOR (FENOR)
看板Biotech
标题[求救] 请问这样是不是因为菌量太多
时间Thu May 6 14:32:10 2010
小弟我今天抽E.coli的genomic DNA
加入了TE buffer 还有SDS 跟Proteinase K
过了一个小时後进行了phenol/chloroform沉淀和离心，
就在离心完之後要抽取上清液的时候，
发现这部分居然凝结成一块果冻..............
是不是因为菌量太多导致核酸浓度太大啊?
请问有人有遇到过类似的问题吗?
备注:我是挑菌的单一菌落养在3CC LB养了约十六小时。
冏，唯一可以肯定的是这次应该是做不下去了@@
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◆ From: 140.112.135.172
※ 编辑: FENOR 来自: 140.112.135.172 (05/06 14:33)
1F：→ sardine:虽然我看不知道问题在哪 但提供你一个数据 05/06 20:34
2F：→ sardine:学长养了100公升的菌overnight 收获量预估是600mg 05/06 20:35
3F：推 Rarelay:一百公升阿...？！ 05/06 23:13
4F：推 sheepfeather:100L要用发酵槽养了吧 XD 05/06 23:54
5F：→ yaprint:是因为SDS的关系吗 低温会凝固 只是猜猜～ 05/07 18:39
6F：推 Fourfish:应该是DNA太浓没错 用传统法抽质体也会有这一坨果冻(3ml) 05/08 00:25
7F：→ Fourfish:只是抽质体是把这一坨果冻(gDNA)用牙签挑掉 05/08 00:26
8F：→ Fourfish:光抽质体1.5ml菌就抽出一堆了 如果只是要抽DNA跑PCR的话 05/08 00:28
9F：→ Fourfish:应该用几十或百ul抽就够用了吧... 05/08 00:29
10F：→ snowypuppy:100公升好惊人呀...我家一个mini都养5ml 05/08 01:30