作者asapeman (.......................)
看板Biotech
標題[求救] 細胞seeding在24 well都會集中在中間
時間Tue May 4 21:47:51 2010
我將10公分盤的細胞trypsin下來後,拿去離心,屬細胞
用所要的medium量回沖細胞,也確實將細胞打散
但是load到24 well盤之後,用顯微鏡看都是非常集中在中間
用十字搖法反而更糟,也有照爬文所看來的輕拍四周,將細胞拍起來後靜置沉降
雖然是有將細胞拍起來,但是放入incubator數分鐘後用顯微鏡看還是集中在中間
由於我的細胞屬於比較不耐的,操作久了很容易狀況不好
這個問題已經困擾我很久了,請大家幫忙解惑
謝謝~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 221.169.119.105
1F：推 leoblack:從24well開始用十字搖法就不太有用了,建議直接配那個濃度 05/04 22:41
2F：→ leoblack:直接下,ex 每個well要有500ul,total 1x10^5的細胞數的話 05/04 22:43
3F：→ leoblack:你就把你要種的濃度調到2x10^5/ml,然後直接500ul種進去 05/04 22:44
4F：→ leoblack:全部種完在輕拍四周 05/04 22:44
5F：推 bee921:之前遇過同樣的事 算好細胞溶好Medium後 加到well不要搖 05/05 10:12
6F：推 snowypuppy:我都邊看顯微鏡邊把細胞搖均勻～～ 05/06 21:15
7F：→ snowypuppy:十字法有時細胞反而更容易集中在中間～我都用畫圈圈搖 05/06 21:16
8F：推 hhhhh100000:同意B大的說法 在MEDIUM混好 加進去不要搖 05/07 16:02
9F：推 robertkoch:這個現象很有趣,叫"茶葉悖論"愛因斯坦的論文之一 05/10 01:14
10F：→ robertkoch:話說俺還為了這個跟中研院生醫所某PI吵起來了呢 05/10 01:15
11F：→ robertkoch:俺是resuspension後再操作台靜置1h等他貼後再移去培養 05/10 01:18