作者asapeman (.......................)
看板Biotech
标题[求救] 细胞seeding在24 well都会集中在中间
时间Tue May 4 21:47:51 2010
我将10公分盘的细胞trypsin下来後,拿去离心,属细胞
用所要的medium量回冲细胞,也确实将细胞打散
但是load到24 well盘之後,用显微镜看都是非常集中在中间
用十字摇法反而更糟,也有照爬文所看来的轻拍四周,将细胞拍起来後静置沉降
虽然是有将细胞拍起来,但是放入incubator数分钟後用显微镜看还是集中在中间
由於我的细胞属於比较不耐的,操作久了很容易状况不好
这个问题已经困扰我很久了,请大家帮忙解惑
谢谢~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 221.169.119.105
1F：推 leoblack:从24well开始用十字摇法就不太有用了,建议直接配那个浓度 05/04 22:41
2F：→ leoblack:直接下,ex 每个well要有500ul,total 1x10^5的细胞数的话 05/04 22:43
3F：→ leoblack:你就把你要种的浓度调到2x10^5/ml,然後直接500ul种进去 05/04 22:44
4F：→ leoblack:全部种完在轻拍四周 05/04 22:44
5F：推 bee921:之前遇过同样的事 算好细胞溶好Medium後 加到well不要摇 05/05 10:12
6F：推 snowypuppy:我都边看显微镜边把细胞摇均匀～～ 05/06 21:15
7F：→ snowypuppy:十字法有时细胞反而更容易集中在中间～我都用画圈圈摇 05/06 21:16
8F：推 hhhhh100000:同意B大的说法 在MEDIUM混好 加进去不要摇 05/07 16:02
9F：推 robertkoch:这个现象很有趣,叫"茶叶悖论"爱因斯坦的论文之一 05/10 01:14
10F：→ robertkoch:话说俺还为了这个跟中研院生医所某PI吵起来了呢 05/10 01:15
11F：→ robertkoch:俺是resuspension後再操作台静置1h等他贴後再移去培养 05/10 01:18