作者championelmo (elmo軒)
看板Biotech
標題[求救] 請介紹聚合酶給我
時間Sat May 1 10:51:01 2010
我需要一種限制酶
在做完PCR號不會在3'端留下一個adenine
常見的Taq會留下
我是要做sticky-end PCR
THANKS
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.124.250.3
1F：→ aimin:看不懂.....= = 05/01 11:03
2F：→ ranilla:你搞得我頭好痛 05/01 11:04
3F：推 bluecsky:你要的是不會加A的Taq才對 我們lab使用phusion 05/01 11:28
4F：→ bluecsky:sticky-end PCR我們lab常常使用 05/01 11:28
5F：推 skyken10:Vent Taq也可以~! 05/01 11:44
6F：推 solomo:HIFI也是 05/01 12:06
7F：推 owl628:那算是一種限制酶嗎??? 05/01 12:24
8F：→ championelmo:sorry 我講的不好 05/01 12:36
9F：→ championelmo:謝謝幫忙 05/01 12:36
10F：→ championelmo:請問pfu可以嗎? 05/01 12:38
11F：→ bluecsky:你可以看看那隻polymerase的說明書 一般都會明白跟你講 05/01 12:46
12F：→ bluecsky:會不會多加A 05/01 12:46
13F：→ ranilla:回應的時候應要看清楚sticky or overhangs or blunt ends 05/01 12:46
14F：→ ranilla:有proofreading 3'->5' exonuclease activity就可做出 05/01 12:48
15F：→ bluecsky:我反而不懂樓上在說什麼 囧.. 05/01 12:48
16F：→ bluecsky:歐 看懂了 沒看到下一段 05/01 12:48
17F：→ ranilla:"blunt end"那應該是原PO要的 05/01 12:48
19F：推 bluecsky:阿...我覺得他真的不是需要restriction enzyme... 05/01 12:55
20F：→ bluecsky:而是需要不會多加A的DNA polymerase去做PCR.. 05/01 12:55
21F：→ ranilla:所以我才覺得在題目有誤的情形下，怎麼大家回答這麼開心 05/01 12:57
22F：推 bluecsky:可是推文回答的好像都是DNA polymerase XD 05/01 12:58
23F：→ bluecsky:他不過問錯方向而已 可能只是不知道有這種polymerase罷了 05/01 12:59
24F：推 conective:應該不是限制酶...是polymerase 05/01 12:59
25F：→ ranilla:原po要的是""blunt end""原非""extra-A"" or "sticky end 05/01 13:06
26F：推 ranilla:問題在於"sticky""blunt""overhang""cohesive" ends..... 05/01 13:11
27F：推 bluecsky:你是不是誤會sticky-end PCR的意思阿?? 05/01 13:12
28F：→ ranilla:的確，我不懂sticky-end PCR 05/01 13:17
29F：→ ranilla:對不起，我認錯，我自己內文搞混 05/01 13:22
30F：→ ranilla:我來去把sticky-end PCR讀一讀，對不起原PO 05/01 13:23
※ 編輯: championelmo 來自: 140.124.250.3 (05/01 13:54)
31F：→ championelmo:是我把聚合酶打錯成限制酶了(又不會改標題...)sorry 05/01 13:57
32F：推 icome:.......y 05/01 14:03
33F：推 sheepfeather:文章前大寫T改標題....另外用PFU就可以了 05/01 14:55
34F：推 amatrrosivi:XDDD 05/01 15:14
35F：→ tw00058329:亞醫HF也ok 05/06 11:03
36F：→ e5f6:sticky-end PCR 是什麼意思?? 05/08 20:09
37F：→ e5f6:我終於看懂他要什麼了XD 05/08 20:11