作者championelmo (elmo轩)
看板Biotech
标题[求救] 请介绍聚合酶给我
时间Sat May 1 10:51:01 2010
我需要一种限制酶
在做完PCR号不会在3'端留下一个adenine
常见的Taq会留下
我是要做sticky-end PCR
THANKS
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.124.250.3
1F：→ aimin:看不懂.....= = 05/01 11:03
2F：→ ranilla:你搞得我头好痛 05/01 11:04
3F：推 bluecsky:你要的是不会加A的Taq才对 我们lab使用phusion 05/01 11:28
4F：→ bluecsky:sticky-end PCR我们lab常常使用 05/01 11:28
5F：推 skyken10:Vent Taq也可以~! 05/01 11:44
6F：推 solomo:HIFI也是 05/01 12:06
7F：推 owl628:那算是一种限制酶吗??? 05/01 12:24
8F：→ championelmo:sorry 我讲的不好 05/01 12:36
9F：→ championelmo:谢谢帮忙 05/01 12:36
10F：→ championelmo:请问pfu可以吗? 05/01 12:38
11F：→ bluecsky:你可以看看那只polymerase的说明书 一般都会明白跟你讲 05/01 12:46
12F：→ bluecsky:会不会多加A 05/01 12:46
13F：→ ranilla:回应的时候应要看清楚sticky or overhangs or blunt ends 05/01 12:46
14F：→ ranilla:有proofreading 3'->5' exonuclease activity就可做出 05/01 12:48
15F：→ bluecsky:我反而不懂楼上在说什麽 囧.. 05/01 12:48
16F：→ bluecsky:欧 看懂了 没看到下一段 05/01 12:48
17F：→ ranilla:"blunt end"那应该是原PO要的 05/01 12:48
19F：推 bluecsky:阿...我觉得他真的不是需要restriction enzyme... 05/01 12:55
20F：→ bluecsky:而是需要不会多加A的DNA polymerase去做PCR.. 05/01 12:55
21F：→ ranilla:所以我才觉得在题目有误的情形下，怎麽大家回答这麽开心 05/01 12:57
22F：推 bluecsky:可是推文回答的好像都是DNA polymerase XD 05/01 12:58
23F：→ bluecsky:他不过问错方向而已 可能只是不知道有这种polymerase罢了 05/01 12:59
24F：推 conective:应该不是限制酶...是polymerase 05/01 12:59
25F：→ ranilla:原po要的是""blunt end""原非""extra-A"" or "sticky end 05/01 13:06
26F：推 ranilla:问题在於"sticky""blunt""overhang""cohesive" ends..... 05/01 13:11
27F：推 bluecsky:你是不是误会sticky-end PCR的意思阿?? 05/01 13:12
28F：→ ranilla:的确，我不懂sticky-end PCR 05/01 13:17
29F：→ ranilla:对不起，我认错，我自己内文搞混 05/01 13:22
30F：→ ranilla:我来去把sticky-end PCR读一读，对不起原PO 05/01 13:23
※ 编辑: championelmo 来自: 140.124.250.3 (05/01 13:54)
31F：→ championelmo:是我把聚合酶打错成限制酶了(又不会改标题...)sorry 05/01 13:57
32F：推 icome:.......y 05/01 14:03
33F：推 sheepfeather:文章前大写T改标题....另外用PFU就可以了 05/01 14:55
34F：推 amatrrosivi:XDDD 05/01 15:14
35F：→ tw00058329:亚医HF也ok 05/06 11:03
36F：→ e5f6:sticky-end PCR 是什麽意思?? 05/08 20:09
37F：→ e5f6:我终於看懂他要什麽了XD 05/08 20:11