作者yp (熊皮)
看板Biotech
標題[求救] 請問vector與insert序列中皆有ATG？
時間Fri Apr 30 22:12:35 2010
請問各位先進
目前有一vector cloning site之前有設計一組ATG,
而手邊要使用的insert 其起始序列也含有ATG,
接入之後 經過計算 此兩個ATG是不同的frame.
1. 請問這時的蛋白質表現是會為何？ (僅有vector的 僅有insert的 還是皆有?)
Insert的部份能夠表現出預期的蛋白質嗎？
2. 若是不行的話 請問各位有何建議？
如：需重設計引子 然後使用vector的ATG?
換掉vector? (由於實驗限制 這點暫不考慮)
.........
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.96.151
1F：→ chaunen:看看有沒有切點是不會影響到frame的? 04/30 22:30
2F：→ ranilla:我認為在強大的promoter下，兩者皆會有，在不inframe時 04/30 22:48
3F：→ ranilla:會被你所使用的抗體自動忽略 04/30 22:49
4F：推 senlin:這情形我碰過 會從vector的開始 想辦法把vector上的ATG拿掉 05/01 11:42
5F：→ chaunen:我的話會重新設primer,使用vector上的ATG 05/02 03:32
6F：→ chaunen:如果vector的ATG到你target gene的ATG之間序列不會太長 05/02 04:07
7F：→ yp:謝謝回答 05/03 22:31