作者yp (熊皮)
看板Biotech
标题[求救] 请问vector与insert序列中皆有ATG？
时间Fri Apr 30 22:12:35 2010
请问各位先进
目前有一vector cloning site之前有设计一组ATG,
而手边要使用的insert 其起始序列也含有ATG,
接入之後 经过计算 此两个ATG是不同的frame.
1. 请问这时的蛋白质表现是会为何？ (仅有vector的 仅有insert的 还是皆有?)
Insert的部份能够表现出预期的蛋白质吗？
2. 若是不行的话 请问各位有何建议？
如：需重设计引子 然後使用vector的ATG?
换掉vector? (由於实验限制 这点暂不考虑)
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◆ From: 140.112.96.151
1F：→ chaunen:看看有没有切点是不会影响到frame的? 04/30 22:30
2F：→ ranilla:我认为在强大的promoter下，两者皆会有，在不inframe时 04/30 22:48
3F：→ ranilla:会被你所使用的抗体自动忽略 04/30 22:49
4F：推 senlin:这情形我碰过 会从vector的开始 想办法把vector上的ATG拿掉 05/01 11:42
5F：→ chaunen:我的话会重新设primer,使用vector上的ATG 05/02 03:32
6F：→ chaunen:如果vector的ATG到你target gene的ATG之间序列不会太长 05/02 04:07
7F：→ yp:谢谢回答 05/03 22:31