作者thewholeshit (wie geht es Ihnen?)
看板Biotech
標題[求救] western blot壓不出來
時間Fri Apr 30 10:19:17 2010
我現在做的是把細胞感染病毒之後
等三天收cell lysate跑western blo測蛋白含量
但是我一直壓不到東西
一開始壓壓菌液時沒有問題
該出來的東西都可以看得到
所以我的步驟應該沒有問題
之後使用真核系統表現
但是不知道為什麼membrane上都一片空白
除了positive control之外什麼都沒有
一開始覺得是表現的問題
所以試了很多方法也重做很多次
但是都沒有結果
後來學姊接手過去做
就成功了
現在我要再把大量培養的病毒打到動物體內
但是經過大量培養
也確認有感染成功的細胞(用螢光偵測過)
還是壓不出來
只有positive control很漂亮 冏
請問有可能是什麼原因?
謝謝
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1F:→ turtle24:實驗流程可以請學姐盯著你做有沒有地方不同 04/30 11:18
2F:推 bluecsky:positive有出來 那大概是前面sample的問題 05/01 17:22
3F:→ bluecsky:所以你要思考的不是WB操作方面 而是sample方面的問題 05/01 17:22
4F:→ bluecsky:例如收集sample後怎麼處理到去跑WB 05/01 17:22