作者thewholeshit (wie geht es Ihnen?)
看板Biotech
标题[求救] western blot压不出来
时间Fri Apr 30 10:19:17 2010
我现在做的是把细胞感染病毒之後
等三天收cell lysate跑western blo测蛋白含量
但是我一直压不到东西
一开始压压菌液时没有问题
该出来的东西都可以看得到
所以我的步骤应该没有问题
之後使用真核系统表现
但是不知道为什麽membrane上都一片空白
除了positive control之外什麽都没有
一开始觉得是表现的问题
所以试了很多方法也重做很多次
但是都没有结果
後来学姊接手过去做
就成功了
现在我要再把大量培养的病毒打到动物体内
但是经过大量培养
也确认有感染成功的细胞（用萤光侦测过）
还是压不出来
只有positive control很漂亮 冏
请问有可能是什麽原因？
谢谢
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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◆ From: 140.109.32.9
1F：→ turtle24:实验流程可以请学姐盯着你做有没有地方不同 04/30 11:18
2F：推 bluecsky:positive有出来 那大概是前面sample的问题 05/01 17:22
3F：→ bluecsky:所以你要思考的不是WB操作方面 而是sample方面的问题 05/01 17:22
4F：→ bluecsky:例如收集sample後怎麽处理到去跑WB 05/01 17:22