作者complexomic (複合質體)
看板Biotech
標題Re: [討論] 有關Western的小問題
時間Fri Apr 30 01:27:51 2010
※ 引述《complexomic (複合質體)》之銘言：
我想問看看，有人做完後會回收一抗嗎???
實驗室的其他人說一抗可以回收，最多做二~三次
二抗就不要回收，每次都泡新的
另外，如果是馬兜鈴酸對HK-2 cell的影響
屬於探討細胞骨架的實驗，用beta-actin當control
是否恰當，還是要用GAPDH比較好呢??
感謝回答
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 219.68.157.5
1F：→ lail:可以回收的話就回收阿...抗體很貴的說... 04/30 02:21
2F：推 boblu:一抗其實可以回收很多次 二抗也可以回收兩三次 04/30 04:33
3F：→ boblu:"很多次" 比較極端的定義是用到博士畢業 04/30 04:34
4F：推 LIAR:我用的synapsin I和neurofilament超強，有過30次以上的記錄 04/30 07:30
5F：→ turtle24:短時間使用回收ok 隔很久還是泡新的比較好 04/30 11:15
6F：推 celestial318:可以reuse 二抗比較沒差吧 因為一抗很貴... 04/30 12:48
7F：推 leoblack:1抗需要高專一性才夠格當1抗,所以貴,還能用就盡管reuse~ 04/30 13:01
8F：→ leoblack:二抗便宜~所以才說不用省~不然~要reuse其實也是可以~ 04/30 13:02
9F：→ leoblack:真的想省~就拿blocking用的牛奶繼續拿來泡2抗,一起省牛奶 04/30 13:02
10F：推 bluecsky:是可以回收 不過一般都是考慮實驗目的來絕定是否使用回收 04/30 20:47
11F：→ bluecsky:打錯 是"決定" 04/30 20:48
12F：→ bluecsky:因為如果是一般確認表現用的實驗 就用回收的 04/30 20:48
13F：→ bluecsky:但是如果是重要data 還是會用新的 雖然理論上用回收也行 04/30 20:49
14F：→ bluecsky:不過不會希望到時候做不出來或是做不好又多一個可疑原因 04/30 20:49
15F：推 snowypuppy:我的原則也跟bluecsky一樣～一抗可回收多次 05/01 02:52
16F：→ snowypuppy:但重要實驗還是會用新泡的抗體 05/01 02:52
17F：推 tincta:我一抗都有回收但二抗都用新的，一抗回收後可用幾次隨著 05/01 13:14
18F：→ tincta:著不同之抗體會不一樣，需要自己試驗，關鍵時刻不會用re的 05/01 13:15
19F：推 Lambe:頂多一兩次吧 如果用牛奶泡很容易壞 實驗要因此重來不划算 05/02 04:19