作者complexomic (复合质体)
看板Biotech
标题Re: [讨论] 有关Western的小问题
时间Fri Apr 30 01:27:51 2010
※ 引述《complexomic (复合质体)》之铭言：
我想问看看，有人做完後会回收一抗吗???
实验室的其他人说一抗可以回收，最多做二~三次
二抗就不要回收，每次都泡新的
另外，如果是马兜铃酸对HK-2 cell的影响
属於探讨细胞骨架的实验，用beta-actin当control
是否恰当，还是要用GAPDH比较好呢??
感谢回答
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 219.68.157.5
1F：→ lail:可以回收的话就回收阿...抗体很贵的说... 04/30 02:21
2F：推 boblu:一抗其实可以回收很多次 二抗也可以回收两三次 04/30 04:33
3F：→ boblu:"很多次" 比较极端的定义是用到博士毕业 04/30 04:34
4F：推 LIAR:我用的synapsin I和neurofilament超强，有过30次以上的记录 04/30 07:30
5F：→ turtle24:短时间使用回收ok 隔很久还是泡新的比较好 04/30 11:15
6F：推 celestial318:可以reuse 二抗比较没差吧 因为一抗很贵... 04/30 12:48
7F：推 leoblack:1抗需要高专一性才够格当1抗,所以贵,还能用就尽管reuse~ 04/30 13:01
8F：→ leoblack:二抗便宜~所以才说不用省~不然~要reuse其实也是可以~ 04/30 13:02
9F：→ leoblack:真的想省~就拿blocking用的牛奶继续拿来泡2抗,一起省牛奶 04/30 13:02
10F：推 bluecsky:是可以回收 不过一般都是考虑实验目的来绝定是否使用回收 04/30 20:47
11F：→ bluecsky:打错 是"决定" 04/30 20:48
12F：→ bluecsky:因为如果是一般确认表现用的实验 就用回收的 04/30 20:48
13F：→ bluecsky:但是如果是重要data 还是会用新的 虽然理论上用回收也行 04/30 20:49
14F：→ bluecsky:不过不会希望到时候做不出来或是做不好又多一个可疑原因 04/30 20:49
15F：推 snowypuppy:我的原则也跟bluecsky一样～一抗可回收多次 05/01 02:52
16F：→ snowypuppy:但重要实验还是会用新泡的抗体 05/01 02:52
17F：推 tincta:我一抗都有回收但二抗都用新的，一抗回收後可用几次随着 05/01 13:14
18F：→ tincta:着不同之抗体会不一样，需要自己试验，关键时刻不会用re的 05/01 13:15
19F：推 Lambe:顶多一两次吧 如果用牛奶泡很容易坏 实验要因此重来不划算 05/02 04:19