作者iamrim (笨小孩~)
看板Biotech
標題[求救] surface biotinylation 的 Quenching 步驟....
時間Tue Apr 20 08:33:09 2010
用biotin去label surface protein (ex:E-cadherin)
證明E-cadherin internalization
在Quenching buffer(reduced glutathione,0.83M NaOH..)treatment
去除在surface上bibotin
但treat Quenching buffer之後,細胞就開始有點飄飄
有點黏稠的透明液(該不會是細胞都破了.DNA流出來?!)
加了PBS之後細胞全都飄了...(Quenching buffer還蠻鹼的)~
不加PBS直接lysis.protein都不知道有沒有收好>"<
不知道該怎麼辦才好....
希望有經驗的可以指導...謝謝
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