作者iamrim (笨小孩~)
看板Biotech
标题[求救] surface biotinylation 的 Quenching 步骤....
时间Tue Apr 20 08:33:09 2010
用biotin去label surface protein (ex:E-cadherin)
证明E-cadherin internalization
在Quenching buffer(reduced glutathione,0.83M NaOH..)treatment
去除在surface上bibotin
但treat Quenching buffer之後,细胞就开始有点飘飘
有点黏稠的透明液(该不会是细胞都破了.DNA流出来?!)
加了PBS之後细胞全都飘了...(Quenching buffer还蛮硷的)~
不加PBS直接lysis.protein都不知道有没有收好>"<
不知道该怎麽办才好....
希望有经验的可以指导...谢谢
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