作者whale770909 (whale)
看板Biotech
標題Re: [求救] western做不出來
時間Mon Apr 5 23:35:15 2010
※ 引述《whale770909 (whale)》之銘言：
: 我是跑10%SDS PAGE，樣品是豬精子
: 使用半乾式轉漬，條件是5mA/cm^2，40min
: blocking 1hr
: 一抗則是染overnight
: 二抗1小時，用AP系統呈色
: 我的問題是，用來做control的tubulin一直出不來
: 一抗是使用sigma的mouse anti tubulin，稀釋500倍(新買的，保存在-20，解凍不超過3次)
: 二抗則已經試過我們家那個放不知道幾年的還有跟另一間實驗室借來的二抗(確定可work)
: 二抗放到一千倍(正常是稀釋5000倍)了，出來的只有背景跟淡到不行的band
: 由於這個情況以前沒發生過，現在正在一個點一個點的確認
: 向大家請教問題有可能在哪呢?再做不出來就不用投摘要了ˊˋ
終於找到問題了，應該是買的那株一抗不work，跟其他實驗室借來跑，就生出夢寐以求的band，感謝大家的建議
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◆ From: 59.126.202.132
1F：推 chaunen:有band最美, 希望相隨 04/06 01:35
2F：推 leoblack:那雜band還真是美麗的錯誤啊~(煙) 04/06 02:04
3F：推 soom:推你有回來分享結果/心得 04/06 14:22