作者whale770909 (whale)
看板Biotech
标题Re: [求救] western做不出来
时间Mon Apr 5 23:35:15 2010
※ 引述《whale770909 (whale)》之铭言：
: 我是跑10%SDS PAGE，样品是猪精子
: 使用半乾式转渍，条件是5mA/cm^2，40min
: blocking 1hr
: 一抗则是染overnight
: 二抗1小时，用AP系统呈色
: 我的问题是，用来做control的tubulin一直出不来
: 一抗是使用sigma的mouse anti tubulin，稀释500倍(新买的，保存在-20，解冻不超过3次)
: 二抗则已经试过我们家那个放不知道几年的还有跟另一间实验室借来的二抗(确定可work)
: 二抗放到一千倍(正常是稀释5000倍)了，出来的只有背景跟淡到不行的band
: 由於这个情况以前没发生过，现在正在一个点一个点的确认
: 向大家请教问题有可能在哪呢?再做不出来就不用投摘要了ˊˋ
终於找到问题了，应该是买的那株一抗不work，跟其他实验室借来跑，就生出梦寐以求的band，感谢大家的建议
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 59.126.202.132
1F：推 chaunen:有band最美, 希望相随 04/06 01:35
2F：推 leoblack:那杂band还真是美丽的错误啊~(烟) 04/06 02:04
3F：推 soom:推你有回来分享结果/心得 04/06 14:22