作者saviora (颶風之翼)
看板Biotech
標題[求救] 有關co-transfection
時間Thu Mar 18 19:53:27 2010
目前使用293FT這株細胞來生產lentivirus
請問在生產病毒的時候
是要用一般的293T medium還是含neomycin的293FT medium
因為不知道neomycin會不會對在co-transfection的細胞有影響
謝謝
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◆ From: 211.76.175.171
1F：推 ranilla:neomycin不等於G418 03/18 20:29
2F：→ ranilla:另外，這時再加selective durg的用意在? 03/18 20:33
4F：推 icome:G418是感染細胞後selection用的吧 做病毒加它沒有意義啊 03/18 23:08
5F：推 liuse:293T Neo-resistant 加了 也沒差 哈哈 03/18 23:13
6F：→ ranilla:293T是G418 resistant，不是Neo-resistant 03/18 23:19
7F：推 leoblack:生產病毒時不需要,但收集完後病毒去感染細胞後才需要G418 03/18 23:43
8F：→ saviora:Sorry 是我弄錯了 超低級的錯誤 03/19 00:08
9F：推 kaifish:我想原po並沒有弄錯，293FT這株細胞是專門用來產Lenti 03/19 01:07
10F：→ kaifish:的細胞，Invitrogen的data sheet上的確建議培養是要加 03/19 01:07
11F：→ kaifish:G418培養。可以維持293FT細胞產病毒的效率。有錯請指正。 03/19 01:08
13F：→ kaifish:附 03/19 01:11
14F：推 icome:neomycin和geneticin是相似物 兩者都會被neo基因產物去活性 03/19 09:37
15F：推 leoblack:如果生產病毒的medium要加G418,那收集完後的sup裡還有多 03/19 10:04
16F：→ leoblack:少G418?!被感染的細胞又還要在額外加多少G418才夠篩選? 03/19 10:05
17F：→ leoblack:根本就無從定量起,所以生產病毒時是不加G418的 03/19 10:06
18F：推 kaifish:謝謝樓上的指正。harvest病毒的時候的確可以不加G418， 03/19 22:05
19F：→ kaifish:但平常keep細胞的時候加G418是沒有問題的。 03/19 22:05
20F：→ kaifish:感染細胞後使用的抗生素是視使用的vector而定，以我們 03/19 22:06
21F：→ kaifish:為例，我們實驗室的系統是用puromycin進行篩選。 03/19 22:08
22F：→ kaifish:無論如何，還是感謝您的糾正。 03/19 22:08