作者saviora (飓风之翼)
看板Biotech
标题[求救] 有关co-transfection
时间Thu Mar 18 19:53:27 2010
目前使用293FT这株细胞来生产lentivirus
请问在生产病毒的时候
是要用一般的293T medium还是含neomycin的293FT medium
因为不知道neomycin会不会对在co-transfection的细胞有影响
谢谢
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◆ From: 211.76.175.171
1F：推 ranilla:neomycin不等於G418 03/18 20:29
2F：→ ranilla:另外，这时再加selective durg的用意在? 03/18 20:33
4F：推 icome:G418是感染细胞後selection用的吧 做病毒加它没有意义啊 03/18 23:08
5F：推 liuse:293T Neo-resistant 加了 也没差 哈哈 03/18 23:13
6F：→ ranilla:293T是G418 resistant，不是Neo-resistant 03/18 23:19
7F：推 leoblack:生产病毒时不需要,但收集完後病毒去感染细胞後才需要G418 03/18 23:43
8F：→ saviora:Sorry 是我弄错了 超低级的错误 03/19 00:08
9F：推 kaifish:我想原po并没有弄错，293FT这株细胞是专门用来产Lenti 03/19 01:07
10F：→ kaifish:的细胞，Invitrogen的data sheet上的确建议培养是要加 03/19 01:07
11F：→ kaifish:G418培养。可以维持293FT细胞产病毒的效率。有错请指正。 03/19 01:08
13F：→ kaifish:附 03/19 01:11
14F：推 icome:neomycin和geneticin是相似物 两者都会被neo基因产物去活性 03/19 09:37
15F：推 leoblack:如果生产病毒的medium要加G418,那收集完後的sup里还有多 03/19 10:04
16F：→ leoblack:少G418?!被感染的细胞又还要在额外加多少G418才够筛选? 03/19 10:05
17F：→ leoblack:根本就无从定量起,所以生产病毒时是不加G418的 03/19 10:06
18F：推 kaifish:谢谢楼上的指正。harvest病毒的时候的确可以不加G418， 03/19 22:05
19F：→ kaifish:但平常keep细胞的时候加G418是没有问题的。 03/19 22:05
20F：→ kaifish:感染细胞後使用的抗生素是视使用的vector而定，以我们 03/19 22:06
21F：→ kaifish:为例，我们实验室的系统是用puromycin进行筛选。 03/19 22:08
22F：→ kaifish:无论如何，还是感谢您的纠正。 03/19 22:08