作者rita1986 (朝目標邁進)
看板Biotech
標題[求救] B16F10 in vivo metastasis
時間Wed Mar 3 12:25:36 2010
目前實驗在做某基因knockdown會影響到B16F10的轉移能力
在in vitro transwell migration assay已經看到影響了migration能力
接下來進行in vivo metastasis assay
但try了兩批B6 mice都失敗
實驗過程如下
第一批
將B16F10 melanoma cell打下suspension於PBS中
以29G針頭經由tail vein注射 0.1 ml (2x10^5 cells) (六隻mice)
兩周之後犧牲一隻觀察lung沒有看到colony
剩下五隻三周後只有兩隻有看到colony但沒有paper多
第二批
步驟同第一批只將細胞數加到 3x10^5
目前兩周犧牲一隻lung沒有看到colony
跟學長姐討論過後
細胞數應該是夠的其他paper用2x10^5兩周就可以長很多colony
而且B16F10很常被用來做metastasis應該很容易長
可能最大的原因是29G針頭太小細胞會擠破...
請問有人做這方面的實驗嗎? 可以提供建議救救我 m==m
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◆ From: 120.126.58.35
1F：→ htLiu:我以前是用30G的針,細胞量相同,真的打進去一定會長 03/03 14:14
2F：→ htLiu:也是打入後14天犧牲,取肺臟數黑色結節 03/03 14:16
3F：→ htLiu:打進去的速度還蠻重要的,30MIN/10隻,太慢成功率越低 03/03 14:22
4F：→ nsysuistyle:建議妳確認一下細胞生長狀態 打動物的細胞狀態很重要 03/06 02:34