作者rita1986 (朝目标迈进)
看板Biotech
标题[求救] B16F10 in vivo metastasis
时间Wed Mar 3 12:25:36 2010
目前实验在做某基因knockdown会影响到B16F10的转移能力
在in vitro transwell migration assay已经看到影响了migration能力
接下来进行in vivo metastasis assay
但try了两批B6 mice都失败
实验过程如下
第一批
将B16F10 melanoma cell打下suspension於PBS中
以29G针头经由tail vein注射 0.1 ml (2x10^5 cells) (六只mice)
两周之後牺牲一只观察lung没有看到colony
剩下五只三周後只有两只有看到colony但没有paper多
第二批
步骤同第一批只将细胞数加到 3x10^5
目前两周牺牲一只lung没有看到colony
跟学长姐讨论过後
细胞数应该是够的其他paper用2x10^5两周就可以长很多colony
而且B16F10很常被用来做metastasis应该很容易长
可能最大的原因是29G针头太小细胞会挤破...
请问有人做这方面的实验吗? 可以提供建议救救我 m==m
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.58.35
1F：→ htLiu:我以前是用30G的针,细胞量相同,真的打进去一定会长 03/03 14:14
2F：→ htLiu:也是打入後14天牺牲,取肺脏数黑色结节 03/03 14:16
3F：→ htLiu:打进去的速度还蛮重要的,30MIN/10只,太慢成功率越低 03/03 14:22
4F：→ nsysuistyle:建议你确认一下细胞生长状态 打动物的细胞状态很重要 03/06 02:34