作者liner76 (歐~天呀)
看板Biotech
標題[討論] 細胞繼代方式
時間Wed Mar 3 00:01:50 2010
版上各位前輩好
小弟想請教不同細胞株是否繼代方式也有所差異？
在使用trypsin or edta 繼代前，是否先用PBS wash 洗去培養液中的血清
因為今天小弟的老闆突然說
在繼代前先用PBS潤洗過後，再加少量的trypsin去繼代的方式
PBS的使用對細胞傷害很大(使用的細胞株為Neuro 2A)....所以不可以用...="=
要用pipet吸乾75T的flask內的MEM...吸不乾淨在用pipetman伸進flask內吸...
（重點是pipetman並非可整隻滅菌的...="=）
還說培養幹細胞株的絕對不會使用PBS的說詞
以上問題小弟誠心的請教有經驗的前輩，到底是老闆哪跟筋不對在找場子
或是真的是小弟該死學藝不精？？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 112.104.204.135
1F：→ untilnow:＜－養幹細胞 PBS用爽爽 03/03 00:16
2F：→ turtle24:老闆不准用PBS的話 就用trypsin潤洗吧XD 03/03 00:33
3F：→ musicman:重點是MEM怎麼吸都不會乾淨吧 03/03 00:39
4F：→ liner76:小弟覺得PBS對細胞傷害很大比較嚴重>"< 03/03 00:40
5F：推 lchd:猜測：neuron2A 貼的比較不緊 PBS下去先"沖掉"一半 03/03 01:14
6F：→ lchd:所以才會認為對細胞不好。基本上我碰過的幹細胞PBS都不會有害 03/03 01:15
7F：→ lchd:如果真是那樣 你直接用MEM沖 說不定都掉下來了 省trypsin XD 03/03 01:16
8F：推 conective:培養幹細胞一樣會用PBS阿 ＝ ＝ 03/03 09:11
9F：推 aceliang:幹細胞是無辜的。XD 03/03 09:35
10F：推 icome:不同細胞當然會有差 有的細胞甚至不能用trypsin 03/03 10:50
11F：推 mikoyan:不過有些原廠的 protocol 會建議跑該產品實驗前不使用PBS 03/03 11:16
12F：→ mikoyan:實驗室中有些貼不穩的癌細胞我們還是用 PBS 做潔淨沖洗 03/03 11:17
13F：→ mikoyan:只不過要沿著 dish 邊緣非長慢速的加入 03/03 11:18
14F：推 celestial318:我們都會用PBS wash...應該還好吧= = 03/03 11:39
15F：→ saviora:ATCC上面是寫用0.25%trypsin去洗 03/03 12:53
16F：→ saviora:反正你只要能搞掉裡面的trypsin inhibitor就OK了 03/03 12:54
17F：推 g010377:ESC我們家一樣PBS用爽爽XD 03/03 18:29
18F：→ chaunen:ESC要怎麼養比較不容易分化阿..? 03/03 23:41
19F：→ untilnow:用愛去養它 03/04 01:34
20F：推 st92013:說真的 PBS會傷害細胞的說法我第一次聽過 03/04 13:48
21F：→ Nicoleching:...原po說的是stem cell還是 cell line? 這兩者不同 03/04 17:52
22F：→ elainerau:neuron 2A是cell line 吧...我自己養都會用PBS洗ㄟ ... 03/08 18:58