作者liner76 (欧~天呀)
看板Biotech
标题[讨论] 细胞继代方式
时间Wed Mar 3 00:01:50 2010
版上各位前辈好
小弟想请教不同细胞株是否继代方式也有所差异？
在使用trypsin or edta 继代前，是否先用PBS wash 洗去培养液中的血清
因为今天小弟的老板突然说
在继代前先用PBS润洗过後，再加少量的trypsin去继代的方式
PBS的使用对细胞伤害很大(使用的细胞株为Neuro 2A)....所以不可以用...="=
要用pipet吸乾75T的flask内的MEM...吸不乾净在用pipetman伸进flask内吸...
（重点是pipetman并非可整只灭菌的...="=）
还说培养干细胞株的绝对不会使用PBS的说词
以上问题小弟诚心的请教有经验的前辈，到底是老板哪跟筋不对在找场子
或是真的是小弟该死学艺不精？？
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 112.104.204.135
1F：→ untilnow:＜－养干细胞 PBS用爽爽 03/03 00:16
2F：→ turtle24:老板不准用PBS的话 就用trypsin润洗吧XD 03/03 00:33
3F：→ musicman:重点是MEM怎麽吸都不会乾净吧 03/03 00:39
4F：→ liner76:小弟觉得PBS对细胞伤害很大比较严重>"< 03/03 00:40
5F：推 lchd:猜测：neuron2A 贴的比较不紧 PBS下去先"冲掉"一半 03/03 01:14
6F：→ lchd:所以才会认为对细胞不好。基本上我碰过的干细胞PBS都不会有害 03/03 01:15
7F：→ lchd:如果真是那样 你直接用MEM冲 说不定都掉下来了 省trypsin XD 03/03 01:16
8F：推 conective:培养干细胞一样会用PBS阿 ＝ ＝ 03/03 09:11
9F：推 aceliang:干细胞是无辜的。XD 03/03 09:35
10F：推 icome:不同细胞当然会有差 有的细胞甚至不能用trypsin 03/03 10:50
11F：推 mikoyan:不过有些原厂的 protocol 会建议跑该产品实验前不使用PBS 03/03 11:16
12F：→ mikoyan:实验室中有些贴不稳的癌细胞我们还是用 PBS 做洁净冲洗 03/03 11:17
13F：→ mikoyan:只不过要沿着 dish 边缘非长慢速的加入 03/03 11:18
14F：推 celestial318:我们都会用PBS wash...应该还好吧= = 03/03 11:39
15F：→ saviora:ATCC上面是写用0.25%trypsin去洗 03/03 12:53
16F：→ saviora:反正你只要能搞掉里面的trypsin inhibitor就OK了 03/03 12:54
17F：推 g010377:ESC我们家一样PBS用爽爽XD 03/03 18:29
18F：→ chaunen:ESC要怎麽养比较不容易分化阿..? 03/03 23:41
19F：→ untilnow:用爱去养它 03/04 01:34
20F：推 st92013:说真的 PBS会伤害细胞的说法我第一次听过 03/04 13:48
21F：→ Nicoleching:...原po说的是stem cell还是 cell line? 这两者不同 03/04 17:52
22F：→ elainerau:neuron 2A是cell line 吧...我自己养都会用PBS洗ㄟ ... 03/08 18:58