作者gugin (陳抽筋)
看板Biotech
標題[求救]請求好用的 mycroplasma PCR kit
時間Sun Feb 7 20:50:30 2010
大家好
最近因為在養細胞
但懷疑有 mycroplasma 的污染
因此想用 PCR 的方式來偵測看看
在網路上找了一些 kit 發現有一些產品台灣以經沒有代理了
還有一組是sigma 的 但實驗室的機器不適用這家的 PCR tube
想請大家推薦驗實驗室使用的 PCR kit (廠牌）
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.167.189.75
※ 編輯: gugin 來自: 218.167.189.75 (02/07 20:51)
1F：推 lakerjackt:萬造的PAA mycotrace 口碑還不錯 02/07 21:34
2F：推 phoneta:進階代理的biological industries那組也很不錯 02/07 23:38
3F：推 ranilla:自己設計PRIMER比較省 02/08 09:41
4F：→ ranilla:MYCO-F: 5'-gggAgCAAACAggATTAgATACCCT-3' 02/08 09:46
5F：→ ranilla:MYCO-R: 5'-TgCACCATCTgTCACTCTgTTAACCTC-3' 02/08 09:46
7F：→ ranilla:1ml medium低速離心去細胞，高速離心10分鐘去上清液 02/08 09:55
8F：→ ranilla:看不到的pellet加50ul dd water, 100度5min就是template 02/08 09:57
9F：→ ranilla:大約拿2-3ul作反應就行 02/08 09:58
10F：推 tsubasawolfy:kit會給positive control :) 02/08 10:02
11F：→ gugin:謝謝大家的幫忙 ^_^ 02/08 22:49
12F：→ gugin:不過有一個小問題還是不清楚 如果把 supernatant 離心後 02/08 22:53
13F：→ gugin:再把medium去除 這樣會不會很容易把下面看不到的微小 pellet 02/08 22:54
14F：→ gugin:也吸起來 @@ 這樣會不會造成偽陰性 02/08 22:55
15F：推 ranilla:一隻mycoplasma就有上百個copy number,很難做不出來y 02/09 13:51
16F：→ ranilla:最怕的是negative control,因為即使是滅菌水，若有MYCO. 02/09 13:52
17F：→ ranilla:的屍體，一樣會被測出來 02/09 13:53
18F：→ gugin:哦 那我了解了 謝謝大家的幫忙 ^^ 02/09 23:33