作者gugin (陈抽筋)
看板Biotech
标题[求救]请求好用的 mycroplasma PCR kit
时间Sun Feb 7 20:50:30 2010
大家好
最近因为在养细胞
但怀疑有 mycroplasma 的污染
因此想用 PCR 的方式来侦测看看
在网路上找了一些 kit 发现有一些产品台湾以经没有代理了
还有一组是sigma 的 但实验室的机器不适用这家的 PCR tube
想请大家推荐验实验室使用的 PCR kit (厂牌）
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.167.189.75
※ 编辑: gugin 来自: 218.167.189.75 (02/07 20:51)
1F：推 lakerjackt:万造的PAA mycotrace 口碑还不错 02/07 21:34
2F：推 phoneta:进阶代理的biological industries那组也很不错 02/07 23:38
3F：推 ranilla:自己设计PRIMER比较省 02/08 09:41
4F：→ ranilla:MYCO-F: 5'-gggAgCAAACAggATTAgATACCCT-3' 02/08 09:46
5F：→ ranilla:MYCO-R: 5'-TgCACCATCTgTCACTCTgTTAACCTC-3' 02/08 09:46
7F：→ ranilla:1ml medium低速离心去细胞，高速离心10分钟去上清液 02/08 09:55
8F：→ ranilla:看不到的pellet加50ul dd water, 100度5min就是template 02/08 09:57
9F：→ ranilla:大约拿2-3ul作反应就行 02/08 09:58
10F：推 tsubasawolfy:kit会给positive control :) 02/08 10:02
11F：→ gugin:谢谢大家的帮忙 ^_^ 02/08 22:49
12F：→ gugin:不过有一个小问题还是不清楚 如果把 supernatant 离心後 02/08 22:53
13F：→ gugin:再把medium去除 这样会不会很容易把下面看不到的微小 pellet 02/08 22:54
14F：→ gugin:也吸起来 @@ 这样会不会造成伪阴性 02/08 22:55
15F：推 ranilla:一只mycoplasma就有上百个copy number,很难做不出来y 02/09 13:51
16F：→ ranilla:最怕的是negative control,因为即使是灭菌水，若有MYCO. 02/09 13:52
17F：→ ranilla:的屍体，一样会被测出来 02/09 13:53
18F：→ gugin:哦 那我了解了 谢谢大家的帮忙 ^^ 02/09 23:33