作者wayne841503 (JPG)
看板Biotech
標題[求救] trypan blue 存活率
時間Sat Feb 6 16:22:43 2010
因為實驗需要算細胞的存活率(HepG2)
我們是用trypan blue來做初步的存活率計算
但我有個疑問...
因為HepG2是屬於貼附型的細胞
而將細胞收下來前會先將medium抽掉
再用PBS來wash 2次
後在用trypsin將其打下
最後再用含有血清的medium中和
而後取20 ul出來算存活率
我的問題是...在PBS wash的那個步驟不就將很多死細胞沖掉了?
那存活率還準嗎??
今天在用藥物處裡後發現在3cm dish中看起來死的非常多 很多細胞在飄...
但收下來用trypan blue算出的存活率卻高達95%
所以才想到這個問題
麻煩有做過的可以幫忙解答一下
謝謝^^
--
◤ ▂◎▅◎▂ ◆
◆ ▲▲ ◥
◢◤◥◥ ◣ ◆
◆ ◢◥◤◥◣ ◣東方project系列
▋＞ ＜◢▋ ◆
◆ ▋◣ ◢ ▍ ￣￣￣￣￣￣￣
▌▄▄▄◤▎ ◆
◆ ◆
◆ ◥◣▄▄▄◢◤ 持續推廣ing
▼| |▼ ◆
◆ ◥ ￣██>◥◤
◣ ▲▆▲ 少女受虐中... ◆
◆ ◤ ▼◥ ψ涼宮 域 gbwind ◢
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.37.162
1F：→ daniel2806:因為在PBS就被洗掉了..... 02/06 18:47
2F：→ daniel2806:現在有很多試劑可以看存活率 考慮一下吧 02/06 18:48
3F：推 inchew:SRB assay挺方便的 比較沒上述的損失問題 02/07 01:44
4F：推 pichia:WST-1 MTT XTT~ 02/07 02:46
5F：→ lausDeo:計算方式不對吧？ 你要以medium組的細胞數為100% 02/07 15:19
6F：→ lausDeo:treatment組細胞數除以medium組細胞數 這樣就可以啦 02/07 15:19
7F：推 bigrat:去medium時把漂浮的細胞也收下來 02/07 21:01
8F：推 chvkimo:同 bigrat大 02/08 00:40