作者wayne841503 (JPG)
看板Biotech
标题[求救] trypan blue 存活率
时间Sat Feb 6 16:22:43 2010
因为实验需要算细胞的存活率(HepG2)
我们是用trypan blue来做初步的存活率计算
但我有个疑问...
因为HepG2是属於贴附型的细胞
而将细胞收下来前会先将medium抽掉
再用PBS来wash 2次
後在用trypsin将其打下
最後再用含有血清的medium中和
而後取20 ul出来算存活率
我的问题是...在PBS wash的那个步骤不就将很多死细胞冲掉了?
那存活率还准吗??
今天在用药物处里後发现在3cm dish中看起来死的非常多 很多细胞在飘...
但收下来用trypan blue算出的存活率却高达95%
所以才想到这个问题
麻烦有做过的可以帮忙解答一下
谢谢^^
--
◤ ▂◎▅◎▂ ◆
◆ ▲▲ ◥
◢◤◥◥ ◣ ◆
◆ ◢◥◤◥◣ ◣东方project系列
▋> <◢▋ ◆
◆ ▋◣ ◢ ▍  ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄
▌▄▄▄◤▎ ◆
◆ ◆
◆ ◥◣▄▄▄◢◤ 持续推广ing
▼| |▼ ◆
◆ ◥  ̄██>◥◤
◣ ▲▆▲ 少女受虐中... ◆
◆ ◤ ▼◥ ψ凉宫 域 gbwind ◢
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.37.162
1F:→ daniel2806:因为在PBS就被洗掉了..... 02/06 18:47
2F:→ daniel2806:现在有很多试剂可以看存活率 考虑一下吧 02/06 18:48
3F:推 inchew:SRB assay挺方便的 比较没上述的损失问题 02/07 01:44
4F:推 pichia:WST-1 MTT XTT~ 02/07 02:46
5F:→ lausDeo:计算方式不对吧? 你要以medium组的细胞数为100% 02/07 15:19
6F:→ lausDeo:treatment组细胞数除以medium组细胞数 这样就可以啦 02/07 15:19
7F:推 bigrat:去medium时把漂浮的细胞也收下来 02/07 21:01
8F:推 chvkimo:同 bigrat大 02/08 00:40