作者valentine7 (噴噴貓)
看板Biotech
標題[求救] 冷凍切片 IHC 貼片問題
時間Thu Jan 14 20:32:21 2010
我是沒有人帶的冷凍切片新手
我的方式是切下來之後
(腦 切30um)
在cryostat用水彩筆小心展片之後
以存放於室溫的玻片去沾取腦片
腦片就會貼附在玻片上
練習了幾次之後
已經可以展得很好
但是卻發現新的問題
就是在"貼"的這個動作
腦片與玻片之間出現空隙 也就是產生了像是"氣室"的東西...
尤其是在加了H2O2之後更加明顯
(一開始還不知道是這個問題 只覺得厚薄不一
貼得好的腦片 加了H2O2不怎麼產生氣泡
沒貼好的腦片 則是產上一堆氣泡 尤其是腦片與玻片之間尤其明顯 且去不掉...)
導致之後的染色 看片 都很糟糕
請問各位高手有沒有甚麼小TIP
可以教教小妹
謝謝!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.96.249
1F:→ faycos:我也會這樣耶~~怎麼辦? 01/14 21:17
2F:推 wintercastle:玻片有沒有經過coating處理? 01/14 21:34
3F:推 vandia:拉片的角度要練一下..一定不能平行下去貼 01/14 23:11
4F:→ vandia:要練先沾一邊,然後順勢往上拉,這樣貼出來就會很平整 01/14 23:12
5F:→ vandia:同理可以用在石蠟片 01/14 23:13
6F:→ valentine7:有coated的 好 謝謝樓上 我下次再多練幾次!!! 01/15 14:16
7F:→ valentine7:我發現8um比較不會有這個問題耶 隨便貼都漂亮 01/21 11:05
8F:→ valentine7:但30um的 真的很難!!! 01/21 11:05
9F:→ agh0913:冷凍切片不建議H2O2處理 可以用Sodium Azide(NaN3)取代 01/23 15:24
10F:推 DanteDevil:真的只有多練練了...角度很重要... 03/04 12:13