作者valentine7 (喷喷猫)
看板Biotech
标题[求救] 冷冻切片 IHC 贴片问题
时间Thu Jan 14 20:32:21 2010
我是没有人带的冷冻切片新手
我的方式是切下来之後
(脑 切30um)
在cryostat用水彩笔小心展片之後
以存放於室温的玻片去沾取脑片
脑片就会贴附在玻片上
练习了几次之後
已经可以展得很好
但是却发现新的问题
就是在"贴"的这个动作
脑片与玻片之间出现空隙 也就是产生了像是"气室"的东西...
尤其是在加了H2O2之後更加明显
(一开始还不知道是这个问题 只觉得厚薄不一
贴得好的脑片 加了H2O2不怎麽产生气泡
没贴好的脑片 则是产上一堆气泡 尤其是脑片与玻片之间尤其明显 且去不掉...)
导致之後的染色 看片 都很糟糕
请问各位高手有没有甚麽小TIP
可以教教小妹
谢谢!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.96.249
1F：→ faycos:我也会这样耶~~怎麽办? 01/14 21:17
2F：推 wintercastle:玻片有没有经过coating处理? 01/14 21:34
3F：推 vandia:拉片的角度要练一下..一定不能平行下去贴 01/14 23:11
4F：→ vandia:要练先沾一边,然後顺势往上拉,这样贴出来就会很平整 01/14 23:12
5F：→ vandia:同理可以用在石蜡片 01/14 23:13
6F：→ valentine7:有coated的 好 谢谢楼上 我下次再多练几次!!! 01/15 14:16
7F：→ valentine7:我发现8um比较不会有这个问题耶 随便贴都漂亮 01/21 11:05
8F：→ valentine7:但30um的 真的很难!!! 01/21 11:05
9F：→ agh0913:冷冻切片不建议H2O2处理 可以用Sodium Azide(NaN3)取代 01/23 15:24
10F：推 DanteDevil:真的只有多练练了...角度很重要... 03/04 12:13