※ 引述《Lanzakuo (尋找愛情留下的痕跡)》之銘言： : 最近養細胞出現了大問題 : 我們是跟隔壁實驗室拿細胞回來養 : 他們養的同一批解凍的細胞狀況很好 : 所以首先排除是細胞原本的問題 : 當我細胞拿回來經過第一次分盤後 : 大概兩天左右~細胞形狀開始有點改變 : 然後細胞內部有氣泡出現~ : medium顏色變黃很快~用顯微鏡看不到有汙染的現象 : (我認為的細菌汙染在顯微鏡下應該可以看到黑色顆粒在動 : 如有不對請指正~感激~) : 但是若從底部對著光線看 可以看到有沙狀的物體在飄~ : 再過幾天細胞就飄了~請問這是何種污染呢? : 另外再請教一下~無菌操作台和培養箱非架設在獨立空間 : (和普通實驗室放在一起) : 房間內無UV燈(只有無菌操作台內有)~ : 汙染的機會會比較大嗎??感謝回答!! 大大的問題我從以前念碩班到現在當助理的實驗室都有遇到 症狀類似 1.確定不是細菌或yeast污染，大小形狀都不對，不會讓medium混濁 生長緩慢 2.不一定會讓細胞死掉，但是就長不好，顯微鏡下看起來細胞會有一些亮點 3.顯微鏡看就細細的黑色沙狀物體，會做布朗運動，不會像細菌快速移動 4.有時候會覺得是細胞碎片，但是隨著培養的時間會越來越多，也會讓medium變黃很快 5.可能會由incubator空氣傳染(有中的會讓別人的細胞也中)， 但最奇的地方是如果只放medium test不會有，要有細胞才會長? 我們有做過mycoplasma test，但不是 對岸的文章他們稱做黑膠蟲，英文則是black dot 目前沒有定論是什麼，可能是一種微細菌，可以通過filter P/S確定無效，G418我加過效果不好 有人說是血清帶來的，但是我medium怎麼測試就是不會有 如果不重要的細胞建議就丟掉，如果重要的細胞據國外論壇說 多用PBS洗幾次，或是不要讓細胞密度太低 我現在有一批stable clone的細胞也中....傷腦筋 -- 。 O .o o。 ○ O . .○° 。° o. o。 . ○ └═╬ ┌╥┼ ╬═┐ ╬═┘ ╔═╗ ║ └═╬ ο ╔═╣ ║ ╬╦╝ ╚═╗ ║ ║ ╔═╬ ╔═╣ o ┼═╬ └╨┘ └╚┘ ┼═╝ ┼═╝ ┼═╝ ┼═╬ ○° o.° 。. o。 ○ 。 O .o .o .。.○. --

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