※ 引述《Lanzakuo (寻找爱情留下的痕迹)》之铭言： : 最近养细胞出现了大问题 : 我们是跟隔壁实验室拿细胞回来养 : 他们养的同一批解冻的细胞状况很好 : 所以首先排除是细胞原本的问题 : 当我细胞拿回来经过第一次分盘後 : 大概两天左右~细胞形状开始有点改变 : 然後细胞内部有气泡出现~ : medium颜色变黄很快~用显微镜看不到有污染的现象 : (我认为的细菌污染在显微镜下应该可以看到黑色颗粒在动 : 如有不对请指正~感激~) : 但是若从底部对着光线看 可以看到有沙状的物体在飘~ : 再过几天细胞就飘了~请问这是何种污染呢? : 另外再请教一下~无菌操作台和培养箱非架设在独立空间 : (和普通实验室放在一起) : 房间内无UV灯(只有无菌操作台内有)~ : 污染的机会会比较大吗??感谢回答!! 大大的问题我从以前念硕班到现在当助理的实验室都有遇到 症状类似 1.确定不是细菌或yeast污染，大小形状都不对，不会让medium混浊 生长缓慢 2.不一定会让细胞死掉，但是就长不好，显微镜下看起来细胞会有一些亮点 3.显微镜看就细细的黑色沙状物体，会做布朗运动，不会像细菌快速移动 4.有时候会觉得是细胞碎片，但是随着培养的时间会越来越多，也会让medium变黄很快 5.可能会由incubator空气传染(有中的会让别人的细胞也中)， 但最奇的地方是如果只放medium test不会有，要有细胞才会长? 我们有做过mycoplasma test，但不是 对岸的文章他们称做黑胶虫，英文则是black dot 目前没有定论是什麽，可能是一种微细菌，可以通过filter P/S确定无效，G418我加过效果不好 有人说是血清带来的，但是我medium怎麽测试就是不会有 如果不重要的细胞建议就丢掉，如果重要的细胞据国外论坛说 多用PBS洗几次，或是不要让细胞密度太低 我现在有一批stable clone的细胞也中....伤脑筋 -- 。 O .o o。 ○ O . .○° 。° o. o。 . ○ └═╬ ┌╥┼ ╬═┐ ╬═┘ ╔═╗ ║ └═╬ ο ╔═╣ ║ ╬╦╝ ╚═╗ ║ ║ ╔═╬ ╔═╣ o ┼═╬ └╨┘ └╚┘ ┼═╝ ┼═╝ ┼═╝ ┼═╬ ○° o.° 。. o。 ○ 。 O .o .o .。.○. --

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