作者toocool5941 (黑)
看板Biotech
標題Re: [求救] 細胞汙染
時間Tue Jan 12 14:57:05 2010
※ 引述《Lanzakuo (尋找愛情留下的痕跡)》之銘言:
: 最近養細胞出現了大問題
: 我們是跟隔壁實驗室拿細胞回來養
: 他們養的同一批解凍的細胞狀況很好
: 所以首先排除是細胞原本的問題
: 當我細胞拿回來經過第一次分盤後
: 大概兩天左右~細胞形狀開始有點改變
: 然後細胞內部有氣泡出現~
: medium顏色變黃很快~用顯微鏡看不到有汙染的現象
: (我認為的細菌汙染在顯微鏡下應該可以看到黑色顆粒在動
: 如有不對請指正~感激~)
: 但是若從底部對著光線看 可以看到有沙狀的物體在飄~
: 再過幾天細胞就飄了~請問這是何種污染呢?
: 另外再請教一下~無菌操作台和培養箱非架設在獨立空間
: (和普通實驗室放在一起)
: 房間內無UV燈(只有無菌操作台內有)~
: 汙染的機會會比較大嗎??感謝回答!!
若確定media變黃不是因為細胞數很多造成的
且media不澄清,那應該是污染跑不掉
菌不一定是黑色顆粒,如鍊球菌是小小顆的圓形透明
如果你的細胞也是圓形的,那就要用大小來判斷是細胞還是菌
可以在media再加1~2X的抗生素去殺,或者勤換media,不過治標不治本
不如重新解凍並且重新檢視實驗室的設計及清潔
我老闆說國外很多都是實驗室細胞室共用
不過要注意很多小細節
像laminar flow和incubator最好在最裡面最角落且不要靠窗
打掃頻率高一點
清掃地板用除塵紙不要用掃把,避免灰塵被掃起來飄到空氣
有錢就買台空氣濾淨器或臭氧機
冷氣機濾網一定要常洗且噴酒精消毒等等...
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◆ From: 120.101.28.208
1F:推 Lanzakuo:那如果是細菌汙染要怎模測試呢?有染劑可以測嗎? 01/12 15:45
2F:→ toocool5941:可參考這個 01/12 16:00
4F:→ toocool5941:黴漿菌比較麻煩,不過有kit。 01/12 16:05
6F:推 reinherd:我很好奇一般來說怎樣會造成黴漿菌感染?? 01/13 06:13
7F:→ iceking:樓上這位大大真早起...一般最大的污染來源是來自於人 01/13 11:40
8F:→ iceking:所以手套和酒精不可少哇,最好再加個口罩... 01/13 11:41
9F:→ iceking:還有千萬不可以使用酒精燈... 01/13 11:47
10F:→ yuasa:想請問一下為啥麼不能用酒精燈阿? 01/13 19:02
11F:→ iceking:酒精燈火焰破壞lamina flow的氣流循環,更容易污染~ 01/14 10:31
12F:→ iceking:自從我沒用酒精燈後,就沒有污染過了~ 約半年的時間~ 01/14 10:35
13F:→ toocool5941:酒精燈的氣流可以自成一個無菌空間,且也很普遍。 01/14 12:24
14F:→ toocool5941:有沒有可能是其他原因? 01/14 12:24
15F:推 tsubasawolfy:酒精燈傳說已經流傳很久了(茶) 01/14 14:30
16F:推 xenosdk:不是傳說.. laminar flow 用火有可能把HEPA filter 03/07 10:48
17F:→ xenosdk:燒個洞... 03/07 10:50