作者toocool5941 (黑)
看板Biotech
标题Re: [求救] 细胞污染
时间Tue Jan 12 14:57:05 2010
※ 引述《Lanzakuo (寻找爱情留下的痕迹)》之铭言：
: 最近养细胞出现了大问题
: 我们是跟隔壁实验室拿细胞回来养
: 他们养的同一批解冻的细胞状况很好
: 所以首先排除是细胞原本的问题
: 当我细胞拿回来经过第一次分盘後
: 大概两天左右~细胞形状开始有点改变
: 然後细胞内部有气泡出现~
: medium颜色变黄很快~用显微镜看不到有污染的现象
: (我认为的细菌污染在显微镜下应该可以看到黑色颗粒在动
: 如有不对请指正~感激~)
: 但是若从底部对着光线看 可以看到有沙状的物体在飘~
: 再过几天细胞就飘了~请问这是何种污染呢?
: 另外再请教一下~无菌操作台和培养箱非架设在独立空间
: (和普通实验室放在一起)
: 房间内无UV灯(只有无菌操作台内有)~
: 污染的机会会比较大吗??感谢回答!!
若确定media变黄不是因为细胞数很多造成的
且media不澄清，那应该是污染跑不掉
菌不一定是黑色颗粒，如链球菌是小小颗的圆形透明
如果你的细胞也是圆形的，那就要用大小来判断是细胞还是菌
可以在media再加1~2X的抗生素去杀，或者勤换media，不过治标不治本
不如重新解冻并且重新检视实验室的设计及清洁
我老板说国外很多都是实验室细胞室共用
不过要注意很多小细节
像laminar flow和incubator最好在最里面最角落且不要靠窗
打扫频率高一点
清扫地板用除尘纸不要用扫把，避免灰尘被扫起来飘到空气
有钱就买台空气滤净器或臭氧机
冷气机滤网一定要常洗且喷酒精消毒等等...
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◆ From: 120.101.28.208
1F：推 Lanzakuo:那如果是细菌污染要怎模测试呢?有染剂可以测吗? 01/12 15:45
2F：→ toocool5941:可参考这个 01/12 16:00
4F：→ toocool5941:霉浆菌比较麻烦，不过有kit。 01/12 16:05
6F：推 reinherd:我很好奇一般来说怎样会造成霉浆菌感染？？ 01/13 06:13
7F：→ iceking:楼上这位大大真早起...一般最大的污染来源是来自於人 01/13 11:40
8F：→ iceking:所以手套和酒精不可少哇,最好再加个口罩... 01/13 11:41
9F：→ iceking:还有千万不可以使用酒精灯... 01/13 11:47
10F：→ yuasa:想请问一下为啥麽不能用酒精灯阿? 01/13 19:02
11F：→ iceking:酒精灯火焰破坏lamina flow的气流循环,更容易污染~ 01/14 10:31
12F：→ iceking:自从我没用酒精灯後,就没有污染过了~ 约半年的时间~ 01/14 10:35
13F：→ toocool5941:酒精灯的气流可以自成一个无菌空间，且也很普遍。 01/14 12:24
14F：→ toocool5941:有没有可能是其他原因? 01/14 12:24
15F：推 tsubasawolfy:酒精灯传说已经流传很久了(茶) 01/14 14:30
16F：推 xenosdk:不是传说.. laminar flow 用火有可能把HEPA filter 03/07 10:48
17F：→ xenosdk:烧个洞... 03/07 10:50