作者Xalocinth (sunshine after rain~~)
看板Biotech
標題[求救] 請問WB 一抗或blocking可以放兩個o/n嗎?
時間Wed Jan 6 19:04:57 2010
要作western blot
因為一些關係 儀器上可能禮拜一才能壓片顯影
但我禮拜五就想要跑膠transfer了
這樣的話 可以4度C blocking 兩個晚上 或是一抗放兩個晚上嗎?
我們一抗都有加NaN3當防腐劑
或甚至是 禮拜六日作到二抗加完反應完 然後membrane放在PBST中保存到禮拜一?
不知道有沒有人這麼做過? ^^"
謝謝~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.66.100
1F：推 lail:transfer完就把membrane以塑膠膜包住用封口機封好，冰-20冰箱 01/06 19:33
2F：→ lail:等確定機器好了再進行之後的步驟 01/06 19:33
3F：推 leoblack:只要你確定不會長菌~放2個o/n沒關係啦~ 01/06 20:50
4F：→ nerdz:blocking這樣放是沒問題的 01/06 21:04
5F：推 celestial318:理論上是OK的 01/06 22:28
6F：→ FUSION87:blocking太久要注意奶粉沉澱的問題，我通常是一抗放兩個 01/07 03:09
7F：→ FUSION87:晚上，二抗放太久會很髒(依二抗種類不同有差) 01/07 03:10
8F：→ FUSION87:也試過Membrane泡buffer(TBS or PBS)放4度是OK的 01/07 03:12
9F：推 chrissim:牛奶沈澱就挫賽了.我曾經有慘痛經驗 Orz 01/07 03:14
10F：→ FUSION87:PVDF的話記得手冊上應該有寫可以放乾用要前再用MeOH激活 01/07 03:16
11F：推 chvkimo:transfer上protein後再放乾 之後還還能用MeOH激活 ? 01/07 10:44
12F：→ cyin592:1抗放4度c兩天是ok的 但PBST泡太久訊號會變弱 不建議 01/07 11:26
13F：→ Xalocinth:嗯嗯 知道了 決定一抗4度C搖兩o/n 感謝大家!! 01/07 20:47
14F：推 tincta:1抗o/n(我用過3天)可以 但是blocking不建議 PBST尤其不建議 01/08 01:00