作者benimaru (小蒼鷹)
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標題[求救] 限制酶切不動的原因
時間Thu Dec 31 11:47:32 2009
各位大大你們好
限制酶切不動的原因有什麼呀
目前遇到一個問題
使用某F牌的酵素PSTZ117和EcoRI
利用yT&A將insert clone 上去
發現到無法切上述的二種enzyme
因為primer之前有使用過也可以成功P出來
但是就是切不出來
所以送定序後
發現到切位是正常的
又想到是不是甲基化的原因
查了這二種enzyme又不會因為甲基化影響(我們使用的是DH5A)
請救各位大大 還有什麼原因會影響
後來又用這二種酵素去切別的SAMPLE 又可以成功切出!!
又用同樣的BUF 和醏素再切一次TA product 仍是無法切出insert!!
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◆ From: 140.127.14.200
1F：推 Fourfish:之前也遇過 EcoRI切不出來 原因不明... 換隻菌試試看吧 12/31 12:22
2F：→ Danielle:TT dimer? 12/31 14:53