作者benimaru (小苍鹰)
站内Biotech
标题[求救] 限制酶切不动的原因
时间Thu Dec 31 11:47:32 2009
各位大大你们好
限制酶切不动的原因有什麽呀
目前遇到一个问题
使用某F牌的酵素PSTZ117和EcoRI
利用yT&A将insert clone 上去
发现到无法切上述的二种enzyme
因为primer之前有使用过也可以成功P出来
但是就是切不出来
所以送定序後
发现到切位是正常的
又想到是不是甲基化的原因
查了这二种enzyme又不会因为甲基化影响(我们使用的是DH5A)
请救各位大大 还有什麽原因会影响
後来又用这二种酵素去切别的SAMPLE 又可以成功切出!!
又用同样的BUF 和醏素再切一次TA product 仍是无法切出insert!!
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.14.200
1F：推 Fourfish:之前也遇过 EcoRI切不出来 原因不明... 换只菌试试看吧 12/31 12:22
2F：→ Danielle:TT dimer? 12/31 14:53