作者nikki0415 (小魚ㄦ~)
看板Biotech
標題[求救] 有人養過HL-60 (eosinophil)的細胞株嗎?
時間Wed Dec 16 16:20:58 2009
又來跟大家求救了~麻煩各位Culture達人!!
我養的是H-60 Clone 15(eosinophil)的cell line
剛開始解凍的時候都可以很清楚的看到一整顆的細胞算大顆的
而且是呈現懸浮狀的
所使用的medium FBS的濃度也都是食科所建議的條件
但是只要解凍後約兩天 細胞就會貼附...
我有記得再解凍隔天換新的medium也有記得瓶蓋微鬆讓CO2進去
可是他真的貼在底下了...
我就將其刮起換新的Flask以及medium
但之後還是會貼附 而且開始出現亮亮的小點在背景 也是貼附的
然後小點會越來越多 我換新的Flask也沒什麼用
接者養了幾天 我的細胞形狀就變得不是當初那麼圓了
也不知道那是不是細胞? 就有一團一團的東西 但分散物質的卻比我原本細胞要小
所以想請各位達人們幫幫我~ Medium都沒有呈現混濁狀
那是汙染嗎? 還是我缺了什麼步驟? 還是哪裡做錯了?
謝謝大家~
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◆ From: 140.128.62.203
1F：推 toocool5941:細胞貼附有什麼不對嗎? 12/16 18:15
2F：→ toocool5941:比細胞小的圓點增生，有可能是鏈球菌 12/16 18:16
3F：→ nikki0415:HL-60是懸浮細胞所以理論上來說應該不能貼對吧? 12/16 18:54
4F：推 aggaci:沒加藥不可能會貼....我看重新解凍或是重新買一批看看 12/16 19:45
5F：→ nikki0415:已經重新解凍過了也... 12/16 23:13
6F：推 aggaci:建議重買 12/17 11:28
7F：推 williamyang:解凍時有記得去掉DMSO嗎？不然會造成分化. 12/17 12:16
8F：→ nikki0415:我沒有離心去掉DMSO 只是用很多Medium去稀釋 因為我怕一 12/17 14:20
9F：→ nikki0415:開始就離心會傷害細胞... 12/17 14:20
10F：→ williamyang:若是你看食工所給你的說明裡,有提到HL-60要去掉DMSO. 12/17 15:43
11F：→ williamyang:所以就放心離心吧,因為我也是這樣做的. 12/17 15:44