作者nikki0415 (小鱼ㄦ~)
看板Biotech
标题[求救] 有人养过HL-60 (eosinophil)的细胞株吗?
时间Wed Dec 16 16:20:58 2009
又来跟大家求救了~麻烦各位Culture达人!!
我养的是H-60 Clone 15(eosinophil)的cell line
刚开始解冻的时候都可以很清楚的看到一整颗的细胞算大颗的
而且是呈现悬浮状的
所使用的medium FBS的浓度也都是食科所建议的条件
但是只要解冻後约两天 细胞就会贴附...
我有记得再解冻隔天换新的medium也有记得瓶盖微松让CO2进去
可是他真的贴在底下了...
我就将其刮起换新的Flask以及medium
但之後还是会贴附 而且开始出现亮亮的小点在背景 也是贴附的
然後小点会越来越多 我换新的Flask也没什麽用
接者养了几天 我的细胞形状就变得不是当初那麽圆了
也不知道那是不是细胞? 就有一团一团的东西 但分散物质的却比我原本细胞要小
所以想请各位达人们帮帮我~ Medium都没有呈现混浊状
那是污染吗? 还是我缺了什麽步骤? 还是哪里做错了?
谢谢大家~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.62.203
1F：推 toocool5941:细胞贴附有什麽不对吗? 12/16 18:15
2F：→ toocool5941:比细胞小的圆点增生，有可能是链球菌 12/16 18:16
3F：→ nikki0415:HL-60是悬浮细胞所以理论上来说应该不能贴对吧? 12/16 18:54
4F：推 aggaci:没加药不可能会贴....我看重新解冻或是重新买一批看看 12/16 19:45
5F：→ nikki0415:已经重新解冻过了也... 12/16 23:13
6F：推 aggaci:建议重买 12/17 11:28
7F：推 williamyang:解冻时有记得去掉DMSO吗？不然会造成分化. 12/17 12:16
8F：→ nikki0415:我没有离心去掉DMSO 只是用很多Medium去稀释 因为我怕一 12/17 14:20
9F：→ nikki0415:开始就离心会伤害细胞... 12/17 14:20
10F：→ williamyang:若是你看食工所给你的说明里,有提到HL-60要去掉DMSO. 12/17 15:43
11F：→ williamyang:所以就放心离心吧,因为我也是这样做的. 12/17 15:44