作者june0101 (JUNE)
看板Biotech
標題[求救] 請教flow cytometry的問題
時間Sun Dec 6 19:18:21 2009
是這樣, 以前我用MACS的系統分離CD34細胞
跑流式細胞儀分析都沒有問題, 不過最近
換了STEMCELL牌子的分離系統, 跑流式細
胞儀卻發生染CD34抗體的細胞, 他的螢光
強度比ISOTYPE還要小(左移), 把兩個檔案
OVERLAY以後, 兩個波呈現完全分離的情況
不過不太確定到底是分離系統出了問題,
還是跑FLOW的問題, FLOW的抗體和之前用
的是相同的, 想知道什麼情況下, SAMPLE
的螢光強度, 會比ISOTYPE微弱那麼多, 希
望有相似經驗的板友能提供可能解答, 感激
不盡!
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◆ From: 140.130.189.48
1F:→ june0101:分離用和FLOW用的抗體, 兩個CLONE不同 12/06 19:25
2F:推 cuh:PMT的voltage前後是否一樣 12/11 17:07
3F:→ cuh:上樣前是否有PRIME(趕氣泡) 注意是否是因氣泡導致的shift 12/11 17:11
4F:推 cuh:抗體不同牌?就幾乎一定不一樣! 或者是你anti-CD34的isotype 12/11 17:15
5F:→ cuh:跟你當control的isotype不同 例如IgG1跟IgG2就會不一樣 12/11 17:17
6F:→ cuh:Mouse的IgG1跟Rat的IgG1也不一樣...等等。 (淺見請參考!) 12/11 17:18