作者mzac1b (Goodday)
看板Biotech
標題[求救] 請問跑flow 的螢光抗體可以直接做免疫染色嗎?
時間Wed Nov 25 22:38:22 2009
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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我買了eBioscience 的FITC抗體 (適用於人的細胞)
但不確定該抗體能否適用我的細胞(貼附的大鼠細胞)
我可不可以直接...
把我想看的細胞養在塑膠盤上然後就直接加抗體進去 (活細胞於培養液中)
過一段時間用螢光顯微鏡觀察
有沒有螢光
藉此來判斷我的抗體是否用於我的細胞??
先感謝指教~~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 192.192.93.58
1F：推 ranilla:原廠沒寫就不能用，就算看到螢光，你相信嗎？ 11/25 22:57
2F：→ untilnow:你可以試....但按你的方法應該會看到全亮... 11/25 23:18
3F：→ mzac1b:另外想再問一下高手flow的染色大概染多久? 要blocking嗎? 11/25 23:30
4F：→ mzac1b:我最近要做 但附近沒人熟 正在蒐集資訊 @@ 感謝~~ 11/25 23:31
5F：→ kotenka:flow染surface marker的話在冰上染20~25分鐘就夠了 11/26 02:20
6F：→ kotenka:有些marker可能需要blocking，要自己試看看 11/26 02:20
7F：推 lchd:如果是染人的細胞 positive negative 做好 還會有可信度 11/26 13:45
8F：→ lchd:但你用對人細胞的抗體 要去染大鼠的細胞...很難解讀data 11/26 13:46
9F：→ lchd:要試的話 至少fix之後 照一般螢光染色的方法去做做看吧.. 11/26 13:50
10F：→ jsi:不同意一樓說的原廠沒寫就不能用 廠商出的貨品是工具 如何將 11/27 00:23
11F：→ jsi:工具使用在新領域 只要經過測試驗證就有可能成為創新的方法 11/27 00:25
12F：→ jsi:例如舊藥新用就是一種例子 11/27 00:26
13F：→ mzac1b:另外再問一個@@ 染色一定要用"staining buffer" 嗎? 11/27 02:00
14F：→ mzac1b:影響很大嗎? 用PBS 或PBST 是不是也可以?? 多謝~~ 11/27 02:00