作者mzac1b (Goodday)
看板Biotech
标题[求救] 请问跑flow 的萤光抗体可以直接做免疫染色吗?
时间Wed Nov 25 22:38:22 2009
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
我买了eBioscience 的FITC抗体 (适用於人的细胞)
但不确定该抗体能否适用我的细胞(贴附的大鼠细胞)
我可不可以直接...
把我想看的细胞养在塑胶盘上然後就直接加抗体进去 (活细胞於培养液中)
过一段时间用萤光显微镜观察
有没有萤光
藉此来判断我的抗体是否用於我的细胞??
先感谢指教~~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 192.192.93.58
1F:推 ranilla:原厂没写就不能用,就算看到萤光,你相信吗? 11/25 22:57
2F:→ untilnow:你可以试....但按你的方法应该会看到全亮... 11/25 23:18
3F:→ mzac1b:另外想再问一下高手flow的染色大概染多久? 要blocking吗? 11/25 23:30
4F:→ mzac1b:我最近要做 但附近没人熟 正在蒐集资讯 @@ 感谢~~ 11/25 23:31
5F:→ kotenka:flow染surface marker的话在冰上染20~25分钟就够了 11/26 02:20
6F:→ kotenka:有些marker可能需要blocking,要自己试看看 11/26 02:20
7F:推 lchd:如果是染人的细胞 positive negative 做好 还会有可信度 11/26 13:45
8F:→ lchd:但你用对人细胞的抗体 要去染大鼠的细胞...很难解读data 11/26 13:46
9F:→ lchd:要试的话 至少fix之後 照一般萤光染色的方法去做做看吧.. 11/26 13:50
10F:→ jsi:不同意一楼说的原厂没写就不能用 厂商出的货品是工具 如何将 11/27 00:23
11F:→ jsi:工具使用在新领域 只要经过测试验证就有可能成为创新的方法 11/27 00:25
12F:→ jsi:例如旧药新用就是一种例子 11/27 00:26
13F:→ mzac1b:另外再问一个@@ 染色一定要用"staining buffer" 吗? 11/27 02:00
14F:→ mzac1b:影响很大吗? 用PBS 或PBST 是不是也可以?? 多谢~~ 11/27 02:00