作者miminin (等待)
看板Biotech
標題[求救] 如何移除溶液中的TCA
時間Sat Nov 21 17:51:52 2009
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發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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因為我的蛋白質太稀，所以做了10%TCA沉澱後跑膠，
銀染後還是看不到BAND，
結果發現我的蛋白質似乎在TCA沉澱(5~20%)的上清液中，
想請問我該怎麼做才能去除溶液中的TCA呢?
原本想藉著透析去TCA的，
但是我的buffer含有EDTA和Tris，
不知道會不會和TCA反應?
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◆ From: 163.24.253.19
1F：推 CErline:啊就不要做TCA沈澱不行嗎？離心濃縮,氮氣吹乾,冷凍乾燥... 11/21 21:38
2F：→ CErline:都可以除去水份，TCA超難回溶的… 11/21 21:39
3F：→ CErline:用透析小心越透越稀… 11/21 21:40
4F：→ missoul:蛋白質沒有沉澱? 離心有發現沉澱物嗎 11/21 23:34
5F：→ missoul:如果只是太稀 建議離心濃縮 有些蛋白置換溶液仍引發沉澱 11/21 23:37
6F：→ Anvec:有EDTA跟Tris 還是可以用TCA沉澱 11/22 11:53
7F：→ Anvec:不過TCA沉澱會讓你的樣品損失很多 特別蛋白質濃度低的時候 11/22 11:55
8F：→ Anvec:比較建議用 missoul 說的方式 或是用濃縮管 11/22 11:56
9F：→ Anvec:冷凍乾燥或是抽真空 都可以試試 11/22 11:58
10F：推 muchmoa:可以用acetone沈澱，比較好回溶 11/22 23:09
11F：→ miminin:謝謝大家的建議，我現在等離心濃縮管到貨再試試吧^^ 11/22 23:40