作者miminin (等待)
看板Biotech
标题[求救] 如何移除溶液中的TCA
时间Sat Nov 21 17:51:52 2009
*[m *[33mctrl
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
因为我的蛋白质太稀,所以做了10%TCA沉淀後跑胶,
银染後还是看不到BAND,
结果发现我的蛋白质似乎在TCA沉淀(5~20%)的上清液中,
想请问我该怎麽做才能去除溶液中的TCA呢?
原本想藉着透析去TCA的,
但是我的buffer含有EDTA和Tris,
不知道会不会和TCA反应?
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.24.253.19
1F:推 CErline:啊就不要做TCA沈淀不行吗?离心浓缩,氮气吹乾,冷冻乾燥... 11/21 21:38
2F:→ CErline:都可以除去水份,TCA超难回溶的… 11/21 21:39
3F:→ CErline:用透析小心越透越稀… 11/21 21:40
4F:→ missoul:蛋白质没有沉淀? 离心有发现沉淀物吗 11/21 23:34
5F:→ missoul:如果只是太稀 建议离心浓缩 有些蛋白置换溶液仍引发沉淀 11/21 23:37
6F:→ Anvec:有EDTA跟Tris 还是可以用TCA沉淀 11/22 11:53
7F:→ Anvec:不过TCA沉淀会让你的样品损失很多 特别蛋白质浓度低的时候 11/22 11:55
8F:→ Anvec:比较建议用 missoul 说的方式 或是用浓缩管 11/22 11:56
9F:→ Anvec:冷冻乾燥或是抽真空 都可以试试 11/22 11:58
10F:推 muchmoa:可以用acetone沈淀,比较好回溶 11/22 23:09
11F:→ miminin:谢谢大家的建议,我现在等离心浓缩管到货再试试吧^^ 11/22 23:40