作者chisarah (莎拉小姐)
看板Biotech
標題[求救] Bradford protein assay問題
時間Fri Nov 20 16:12:40 2009
我的protein lysis sample裡有1% SDS
所以sample用純水稀釋了100倍以後就加上Comassie solution做bradford assay
然後發現顏色是鮮藍色的
再做了blank
blank就是0.01% SDS 再加純水還有Comassie solution
而standard就用20ug/ml的BSA, 溶在純水中
第一個standard用0.02% SDS 稀釋
之後的都用0.01% SDS稀釋 (serial dilution的方法)
所以standard是
10, 5, 2.5, 1.25, 0.625 跟 0.3125 ug/ml
度595nm時 blank的讀數比standard還有強
standard的數都變負了@@"
而sample都差不多是零
我在assay中是不是有什麼做錯了?
在manual裡是說可以測sample裡有0.1%或以下的SDS啊@@"
或者是有什麼其他的方法去測protein濃度的方法嗎?
謝謝!!!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 144.214.50.151
1F：推 wensing:BCA、UV等等很多 google一下就有了 11/20 16:36
2F：推 yangkoumi:有SDS的話要用可以忍受SDS的dye reagent 可以用bio-rad 11/21 12:18
3F：→ yangkoumi:專門定量含有SDS樣品的產品 11/21 12:19
4F：→ june0101:小心干擾物~~ 12/09 00:05