作者chisarah (莎拉小姐)
看板Biotech
标题[求救] Bradford protein assay问题
时间Fri Nov 20 16:12:40 2009
我的protein lysis sample里有1% SDS
所以sample用纯水稀释了100倍以後就加上Comassie solution做bradford assay
然後发现颜色是鲜蓝色的
再做了blank
blank就是0.01% SDS 再加纯水还有Comassie solution
而standard就用20ug/ml的BSA, 溶在纯水中
第一个standard用0.02% SDS 稀释
之後的都用0.01% SDS稀释 (serial dilution的方法)
所以standard是
10, 5, 2.5, 1.25, 0.625 跟 0.3125 ug/ml
度595nm时 blank的读数比standard还有强
standard的数都变负了@@"
而sample都差不多是零
我在assay中是不是有什麽做错了?
在manual里是说可以测sample里有0.1%或以下的SDS啊@@"
或者是有什麽其他的方法去测protein浓度的方法吗?
谢谢!!!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 144.214.50.151
1F：推 wensing:BCA、UV等等很多 google一下就有了 11/20 16:36
2F：推 yangkoumi:有SDS的话要用可以忍受SDS的dye reagent 可以用bio-rad 11/21 12:18
3F：→ yangkoumi:专门定量含有SDS样品的产品 11/21 12:19
4F：→ june0101:小心干扰物~~ 12/09 00:05