作者bbiioo (梅子)
看板Biotech
標題[討論] sample buffer於室溫下會變色
時間Fri Nov 20 08:38:17 2009
蛋白質的sample buffer
配置之後 以往是放在4度C保存
但是 有時後 拿出來時 會有沉澱的情況發生
應該是裡面所含的SDS 所造成的現象
所以~後來就放在室溫下了
結果 整瓶buffer的顏色 從原本的藍 褪色成 偏綠
之後又變成淺淺的褐色
可是~拿去跑膠 跑出來的bane 還蠻正常的
所以，很疑問 到底他顏色變掉 會不會造成什麼影響??
那又是什麼導致變色(有聽過人家說 是pH值的關係??)
另外 SAMPLE BUFFER配方如下
ddH2O 4ml
0.5M Tris-HCl pH6.8 1ml
glycerol 0.8ml
10%SDS 1.6ml
B-me 0.4ml
0.05% Bromophenol blue 0.2ml
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◆ From: 140.130.38.65
1F：→ Fourfish:有顏色的是什麼成分？google一下不就知道了~?? 11/20 10:10
2F：推 tsubasawolfy:B-me吧 不加DTT或B-me的sample buffer都不會變色 11/20 11:41
3F：推 boblu:我家以前 2-ME 都是用前加。如此 sample buffer 可長放室溫 11/20 12:48
4F：→ celestial318:同樓上 11/20 13:39
5F：→ KIKO880:我們家就算加了2-ME也是放室溫，之前實驗室是冰在-20會變 11/20 15:58
6F：→ KIKO880:橘黃色，拿去煮一下就回到藍色了，老師說那是正常的 11/20 15:59
7F：→ chisarah:我們都有加B-me, 可是放在室溫都沒有變色 11/20 16:16
8F：→ chisarah:可是我們有加EDTA 11/20 16:18
9F：推 icome:beta-ME不是不穩定? 我放室溫久了臭味都不見了... 11/20 16:33
10F：→ bbiioo:所以~顏色變化 不會影響就是囉?! 味道~放室溫還是一樣耶 11/20 17:37
11F：推 icome:有顏色變化代表pH變了... 11/20 17:48
12F：→ icome:Bromophenol blue is an acid-base indicator 11/20 17:49
13F：推 tincta:有加2-ME放室溫，但是無變色+1 11/20 23:00
14F：推 Fourfish:不同溫度Tris pH值不同 Bromophenol blue是酸鹼指示劑 11/21 16:52
15F：→ Fourfish:buffer從4度到RT當然會變色 跟2-ME關係不大... 11/21 16:54
16F：推 damyr:pH值的關係，+1滴1M NaoH就好了，不過不加沒什麼差 11/21 17:58
17F：→ bbiioo:恩 那pH值這樣變化 對於跑膠 sample影響 大嗎? 11/22 10:44
18F：→ skylawer:影響不大 因為電泳槽內的buffer遠遠超過sample 的量 11/24 23:39
19F：推 june0101:要看ph會不會影響2ME的還原力 若是DTT變色就沒用了 12/09 00:09